Jel elektroforezi, laboratuvarlarda ayırmak için kullanılan bir yöntemdir. DNA (deoksiribonükleik asit). RNA ve proteinleri ayırmak için de kullanılabilir.
Jel elektroforez sonuçlarını okumak, araştırmacıların bir numunedeki ipliklerin boyutunu belirlemesine olanak tanır. Sürecin nasıl çalıştığını anlamak için önce jel elektroforezi tanımını öğrenmelisiniz.
Jel Elektroforez Tanımı
Jel elektroforezi, kullanılan güçlü bir araçtır. moleküler Biyoloji DNA, RNA ve proteinlerin boyutunu ve elektrik yükünü belirlemek. Daha büyük bir DNA dizisinden enzimler tarafından sindirilen DNA parçalarını kullanarak başlarsınız.
Sonuçlarınız olarak jel elektroforez bant yoğunluğunu kullanarak, parçaların boyutunun ne olduğunu anlayabilirsiniz. Kişi daha sonra bir DNA parmak izi.
Sözcüğün "elektro" kısmından da anlaşılacağı gibi, bir jel elektroforez tanımı bir elektrik alanı kullanımını gerektirir. Elektrotları kaplayan bir tampon solüsyonu, jelin içinde asılı kalması için bir kuyu ve elektrotların kendilerinin bulunduğu özel bir makine kullanılır.
Jel Elektroforezinde Jel
Jel elektroforezi agaroz adı verilen deniz yosunundan agarın saflaştırılmış bir versiyonundan yapılmış bir levha halinde oluşturulmuş bir jelin kullanılmasını gerektirir.
Agaroz jeller çeşitli boyutlardaki yüklü moleküllerin farklı hızlarda hareket edebildiği gözenekli bir matris oluşturur. Bir kalıba dökülmeden önce jel çözeltisine etidyum bromür (EtBr) adı verilen bir kimyasal eklenir.
Ayıracak çok küçük DNA veya protein molekülleriniz varsa, poliakrilamid jel agaroz yerine. Nörotoksik olduğu için poliakrilamid kullanırken dikkatli olun.
Agaroz jel kalıbına özel bir tarak yerleştirilir ve katılaştıktan sonra dikkatlice çıkarılır. Burası, önce özel bir yükleme boyası ile karıştırılmış olan DNA parçasının veya diğer moleküler örneklerin yerleştirildiği yerdir. yükleme boyası sadece DNA'nın hareketini izlemek içindir, çünkü başka türlü görünmez.
Bir de denilen şeyi içeren bir kuyu vardır. DNA merdiveni veya işaretleyici. Bu, çalışılan DNA örnekleriyle boyut karşılaştırması için bilinen bant boyutlarına sahip yüksek kaliteli bir şablon görevi görür. Elektrik alanı uygulandığında, bu negatif yüklü moleküller jel boyunca pozitif uca doğru ilerleyecektir.
Jel Elektroforez Sonuçları
Moleküller jelin sonuna geldikten sonra okuma zamanı gelmiştir. jel elektroforez sonuçları. Jeldeki EtBr boyası DNA'ya kolayca bağlanır, bu nedenle kullanımı ve daha sonra UV ışığı altında DNA floresan bantlarını görebilirsiniz.
Etidyum bromide dokunmamaya büyük özen göstermelisiniz, çünkü DNA'ya afinitesi onu çözebileceği anlamına gelir; bu nedenle bir mutajen olarak kabul edilir. Fiyat noktaları daha yüksek olmasına rağmen artık daha yeni, daha güvenli boyalar mevcuttur.
UV ışığı, DNA veya diğer moleküler numunelerin jel elektroforez bant yoğunluğunu ortaya çıkarır. Bantların bir jel üzerindeki konumu, jelin boyutunu ortaya çıkarır. DNA parçası. jel elektroforez bant yoğunluğu molekülün konsantrasyonunu ortaya çıkarır.
Artık numunelerinizdeki DNA bantlarını DNA merdiven numunesiyle karşılaştırabilirsiniz. Merdivenin bilinen bant boyutları, incelemekte olduğunuz DNA'nın göreceli boyutunu belirlemenize yardımcı olacaktır.
Kaliteli Jel Elektroforezinin Önemi
Jel elektroforezi kullanılmıştır. DNA parmak izi ve adli tıp. Araştırmacıların birçok türün genomları hakkında bilgi belirlemesine yardımcı oldu. Bu önemli alanlar için yüksek kaliteli jel elektroforez sonuçlarının kullanılması esastır.
Bu nedenle, yüksek kaliteli malzemelerle çalışmak ve jel yapımında büyük özen göstermek çok önemlidir. DNA örneklerinin RNA veya proteinlerle kontaminasyonunu önlemek esastır.
Temiz tampon kullandığınızdan emin olun, jeli dikkatlice dökün, böylece tarak kuyuları eşit şekilde oluşur ve tüm reaktifleri uygun sıcaklıkta tutun. Jel elektroforezi bant yoğunluğu canlı ve temiz olmalı, arka planda başka DNA izleri bulunmamalı ve jeli kirleten RNA veya protein bulaşmaları olmamalıdır.
