Bilim adamları ve araştırmacılar, bir laboratuvarda kültürler hazırlayarak bakteri üremesini inceler. Besleyici agar içeren petri kapları, tek bir kaydırma veya aşılamadan bakteri kültürlerini büyütür. Öğrenciler, bir bilim fuarı projesi için bakkal veya sağlıklı gıda mağazalarından alınan malzemeleri kullanarak evde besleyici agar hazırlayabilirler. Geleneksel mutfak aletleri ve temel mutfak gereçleri, petri kaplarında dağıtılabilen steril bir kültür ortamı hazırlamak için gerekli araçları sağlar. Malzemeleri ısıtarak ve yüzeyleri temiz ve kuru tutarak steril teknikleri takip etmek, küf ve partiküllerin kültürü kontamine etmesini önleyerek sonuçları iyileştirecektir.
Bir süzgecin içine bir kahve filtresi yerleştirin ve süzgeci şeffaf kasenin ağzına asın.
Et suyunun filtrenin kenarlarından taşmadığından emin olarak suyu yavaşça filtreye dökün. Filtre partiküllerle tıkanırsa, kullanılmış filtreyi çıkarın, temiz bir filtreyle değiştirin ve suyu dökmeye devam edin.
Süzgeci ve filtreyi kasenin üst kısmından çıkarın ve et suyunun berrak görünüp görünmediğini (yani sıvıda asılı parçacıklar yok) gözlemleyin. Parçacıklar sıvı içinde yüzüyorsa, ikinci bir şeffaf kap ve taze bir kahve filtresi kullanarak Adım 1 ve 2'yi tekrarlayın.
Tencereyi ocağa koyun ve şeffaf suyu tencereye dökün.
Et suyunu içeren tencereye 16 ons damıtılmış su ekleyin.
Ocağı açın ve ısıyı orta-düşük seviyeye ayarlayın. Et suyunu kaynatın (yani, tencerenin yanında küçük kabarcıklar belirir).
Kaynayan et suyuna (yaklaşık 2.5 gram) 1 çay kaşığı agar-agar tozu ekleyin ve toz eriyene kadar karışımı karıştırın. Jelatinin tencerenin dibine (yanabileceği yere) batmasını önlemek ve çözmek için tozu karıştırdığınızdan emin olun.
Tüm agar-agar tozu et suyunda çözülene kadar Adım 7'yi tekrarlayın.
Tüm tozun tamamen çözüldüğünden emin olmak için suyu yaklaşık 1 dakika karıştırmaya devam edin.
Ocağı kapatın, tencerenin kapağını kapatın ve sıvıyı en az 15 dakika soğumaya bırakın.
Kolay montaj için steril petri kaplarını üst üste yerleştirin, ancak kapaklarını çıkarmayın. İstenirse, ılık tencereyi tutmak için bir sehpa yerleştirin. Petri kapları yerine kapaklı muhallebi kapları kullanıyorsanız, muhallebi kaplarını kapları ve kapakları yerleştirerek sterilize edin. folyo kaplı bir kurabiye tepsisine ters çevirin (baş aşağı) ve 375 derecede en az bir saat fırında pişirin Fahrenhayt. Kullanmadan önce sterilize edilmiş kapların ve kapakların tamamen soğuduğundan emin olun.
Tencerenin dış tarafına dikkatlice dokunarak sıcak olup olmadığını kontrol edin ve tencereyi sehpanın üzerine yerleştirin. Tencere dokunulamayacak kadar sıcaksa, tencerenin soğuması için en az 10 dakika bekleyin.
Kapağı çıkarın ve bir kenara koyun. Kepçeyi tencereye yerleştirin.
Bir petri kabından kapağı çıkarın ve tabağı yarıya kadar doldurmak için besin suyunu dağıtın. Tencereyi hemen kapağıyla kapatın.
Petri kaplarının her biri için Adım 14'ü tekrarlayın.
Besin suyunun petri kaplarında en az 1 saat bozulmadan katılaşmasına izin verin.
Besin suyunun tamamen katılaştığını kontrol etmek için petri kaplarını hafifçe yan yana sallayın. Et suyu tamamen jelleşmemişse, tekrar kontrol etmeden önce 20 dakika daha bekleyin.
Steril bir çalışma alanı oluşturmak için bir masayı veya düz yüzeyi bir rulo kağıt havluyla örtün. Bir yaprak kağıt havluyu yırtın ve kalın, dikdörtgen bir bez oluşturmak için dört kez katlayın. Bu tomarı çalışma alanının bir ucuna yerleştirin.
Bir petri kabını steril çalışma alanına aktarın ve kapağı çıkarın. Tabağı dikkatlice çevirin ve bir ucunu katlanmış tomarın yanına yerleştirin, böylece ters ve hafif açılı (kağıt havlu parçasının yanında hafif bir boşluk olacak şekilde) durur.
Kapağı ters çevirin ve steril çalışma yüzeyi üzerindeki petri kabının üzerine yerleştirin. Kapakta su damlacıkları belirirse, örtülü yüzeye yerleştirmeden önce bu nemi hafifçe silkeleyin, ancak kapağın iç kısmına dokunmayın.
Ters çevrilmiş kabın bir tarafını kağıt havlu parçası yerine önceki kabın yanına yerleştirerek her bir petri kabı için 19. ve 20. Adımları tekrarlayın. Bulaşıklar, aşırı nemin buharlaşması için bir tarafta boşluklar bulunan, kademeli bir set olarak görünecektir.
Plakaların kenarlarındaki nemin buharlaşıp uçmadığını kontrol etmek için ters çevrilmiş petri kaplarına bakın. Tüm nem temizlendiğinde, plakaları sağa çevirin ve kullanım için hemen kapaklarla kapatın.
Kapakla örtmeden önce besin agar yüzeyinde istenen kültürü içeren bir swabı silerek besleyici agarı plakaya aşılayın. Petri kabını katı üstte kalacak şekilde çevirin. İnoküle edilmiş petri kabını, kültür için katı madde üstte ve nem, gevşek parçacıklar veya büyümeyi yakalamak için altta kapak olacak şekilde saklayın.
İhtiyacınız Olan Şeyler
- Kahve filtreleri
- Süzgeç
- 2 büyük, şeffaf kase
- 16 oz. yağsız et suyu
- 16 oz. arıtılmış su
- Kapaklı tencere
- Soba, fırın, ocak
- 10 gram agar agar
- Ölçü kaşığı
- karıştırıcı
- Rulo kağıt havlu
- Tencere tutucuları
- Metal kepçe
- Kapaklı steril petri kapları veya şeffaf muhallebi kapları
- Opsiyonel: zamanlayıcı, nihale, fırın, tava, alüminyum folyo, tava
İpuçları
Kapaklarda aşırı nem varsa, kapakları 375 derece Fahrenhayt'a ayarlanmış fırında kurutun ve sterilize edin. en az 1 saat (kapakları fırına koymadan önce alüminyum folyo ile kaplanmış temiz bir tavaya yerleştirdiğinizden emin olun). fırın).
Uyarılar
-
Yanıkları önlemek için güveci tutarken dikkatli olun. Tencerenin kenarı çok sıcaksa tenceredeki sıvı çok sıcaktır. Besleyici et suyu tabaklara dağıtmak için sıcak olmalı, ancak soğutma ve sertleştirme sırasında petri kaplarında aşırı yoğunlaşma oluşturmayacak kadar sıcak olmamalıdır.
İstenmeyen bakterilerin kültüre girmesini önlemek için petri kabının (yani tabak veya kapak) iç kısmına dokunmayın.