Bir mikrobiyolog, mantarları mikroskop altında net bir şekilde görebilmesi için kitin boyaması kullanır. Mantarlar hücre duvarlarında yapısal malzeme olarak kitin kullanırlar, bu nedenle leke hücre duvarını iyi gösterir. Laktofenol pamuk mavisi lekesi, mantarlar için en yaygın lekedir. Fenol mikroorganizmaları öldürür ve mantar enzimlerinin hücreyi parçalamasını önler. Pamuk mavisi boya kitini maviye çevirir. Kitin boyama, ucuz malzemelerle nispeten basit bir prosedürdür. Kendi boyanızı yapabilir veya ticari olarak hazırlanmış leke satın alabilirsiniz.
Bir laktofenol pamuk mavisi çözeltisi hazırlayın. Hassas bir tartı kullanarak 0,05 gram pamuklu mavi boyayı tartın. Boyayı bir test tüpünde 20 mililitre damıtılmış su ile karıştırın ve gece boyunca bırakın.
Ertesi gün leke hazırlığını bitirmeden önce eldiven giyin. 20 ml laktik asidi bir behere koyun ve 20 g fenol kristalleri ile karıştırın. Karışım eriyene kadar karıştırın. 40 ml gliserol ekleyin ve karıştırın. Ardından pamuklu mavi solüsyonu bir parça filtre kağıdından behere süzün ve iyice karıştırın.
Alternatif olarak, ticari olarak hazırlanmış bir leke kaynağı kullanın. Lekeyi oda sıcaklığında saklayın.
Numune tanımlama adı veya numarası ile bir mikroskop lamı etiketleyin. Mikroskop lamı ortasına tek bir su numunesi damlası koymak için steril bir damlalık kullanın. Kuru bir numune için, slayt üzerine tek bir damla yüzde 70 alkol solüsyonu koyun ve ardından kuru numuneyi alkole karıştırmak için steril bir öze kullanın.
Laktofenol pamuk mavisi lekesinin iki damlasını lamın ortasına aktarmak için temiz bir damlalık kullanın. Slaytta yüzde 70 alkol kullanıyorsanız, bunu alkol slayttan buharlaşmadan önce yapın.
Islak numune hazırlamanın bir kenarına mikroskop kapak slipinin bir kenarına dokunun. Slaytın altında hava kabarcığı kalmadığından emin olarak, slipin numune hazırlama üzerine nazikçe düşmesine izin verin. Boyanmış numune artık mikroskop altında incelemeye hazırdır.