Mikrobiyologlar inceliyor mikroorganizmaların özellikleri algler, protozoalar, bakteriler, mantarlar ve virüsler gibi mikroskop kullanarak. Protozoa ve maya hücreleri gibi bazı organizmaları ıslak bir yuva kullanarak gözlemlemek kolay olsa da, bakteri hücrelerinin boyanması gerekir. Bilim adamları, bakteri hücrelerinin ve hücresel yapıların daha iyi görüntülenmesi için Gram boyama, aside dayanıklı boyama ve floresan boyama gibi çeşitli yöntemler geliştirdiler. Bu tür boyama yöntemlerini kullanarak bakterileri sınıflandırmaya yardımcı olan yapısal özellikleri belirlemek mümkündür.
Daha İyi Görselleştirme
Bakteriyel organizmalar o kadar küçüktür ki çoğu sadece bir mikroskop altında görülebilir. büyütme gücü 1000X. Bununla birlikte, yalnızca boyutun büyütülmesi yeterli bir netlik derecesi sağlamaz, bu nedenle görselleştirme için gereken netliği sağlamak için bakterilerin gözlemden önce boyanması gerekir.
Tanımlama ve Sınıflandırma
Bakteri türlerini ayırt etmek için bakteri boyama, diferansiyel boyama olarak bilinir. Gram boyama, bakterileri hücre duvarı içeriğine göre ayırt eden böyle bir diferansiyel boyamadır. Bu yöntemde bakteri hücreleri, mor bir renk almak için bir kristal menekşe lekesi ile reaksiyona girer. Bir leke giderici ajan eklendiğinde, bazı bakteri hücreleri renk kaybederken diğerleri renk kaybetmez. Safranin boyası eklendiğinde, rengi açılan hücreler lekeyi kırmızı görünmek için alırken, rengini kaybetmeyen bakteri hücreleri menekşe renginde kalır. Kırmızı rengi alan bakteri hücrelerine Gram negatif organizmalar, rengi almayanlar ise Gram pozitif organizmalar olarak sınıflandırılır. Gram boyama, enfeksiyonlara karışan bakterilerin ilk tanımlanması için hızlı bir yöntem sağlar. Benzer şekilde asit hızlı boyama prosedürü, Mycobacterium tuberculosis gibi Mycobacteria adı verilen bakteri sınıfına ait organizmaları spesifik olarak tanımlamaya yardımcı olur.
Canlılık Tespiti
Bakteri kültürü örneklerinde, yaşayan bakteri hücrelerinin varlığını tespit etmek genellikle önemlidir. Floresan boyama gibi boyama yöntemleri, kültür hücrelerinin canlı olup olmadığını belirlemeye yardımcı olur. Canlı bakteriler, 5-Siyano-2,3-ditolil Tetrazolyum Klorür (CTC) lekesini kırmızı floresan gösteren bir boyaya dönüştürme yeteneğine sahiptir. Bu nedenle, CTC ile boyanmış kültürler böyle bir floresan yaydığında, canlı bakterilerin varlığını gösterir. Propidium iyodür, yalnızca hasarlı zarlara sahip canlı olmayan hücreler üzerinde etkili olan ve bu nedenle ölü bakteri hücrelerinin tanımlanmasında yararlı olan bir lekedir.
Hücresel Yapıların Tanımlanması
Boyama, birkaç hücresel yapının net bir şekilde görselleştirilmesi için bir yöntem sağlar. Örneğin, Fuelgen boyama yöntemi, bakteri hücreleri içindeki çekirdeğin tanımlanmasına izin verirken, Albert'in boyaması, metakromatik granüllerin görselleştirilmesinde faydalıdır. Benzer şekilde, gümüş emprenye tekniği spiroketlerin tanımlanmasına izin verir. Flagella, Ryu'nun lekesi ile boyandığında gözlemlenmesi kolaydır. Malakit yeşili boyama, bakteri sporlarını tanımlamaya yardımcı olur.