Enterobacter aerogenes ve diğer Enterobacteriaceae türlerinin API-20E test kiti kullanılarak tanımlanması kolaydır. bioMeriuex Inc. tarafından üretilen bu kit, test için 20 mini tüp veya kuyu içerir. Test, test kuyularına saf bir bakteri süspansiyonunun aşılanmasından ve meydana gelen renk reaksiyonlarının okunmasından oluşur. Tanımlama, bu renk reaksiyonlarının sonuçlarının Analitik Profil İndeksi olarak bilinen yedi basamaklı bir koda dönüştürülmesine dayanır. Bu kodu üreticinin veri tabanıyla eşleştirmek, organizmanın tanımlanmasını sağlar.
5 ml sodyum klorür yüzde 0,85 ortam içeren bir ampul açın. 18 ila 24 saatlik bir izolasyon plakasından bir pipetle tek bir koloniyi çıkarın ve ampule ekleyin. Homojen bir süspansiyon elde etmek için karıştırın. Hazırlamayı bitirir bitirmez bu süspansiyonu kullanın.
Kapaklı bir tepside petekli kuyulardan oluşan bir kuluçka kutusu kurun. Kutuyu açın ve tepsi kuyularına 5 ml demineralize veya distile su ekleyin. API 20E test kitinde sağlanan stribi paketinden çıkarın ve inkübasyon kutusuna yerleştirin.
"GEL", "VP" ve "CIT" ile işaretlenmiş kuyucukların tüpünü ve cupülünü hazırladığınız süspansiyon ile doldurun. Kalan kuyularda bakteri süspansiyonunu tüpe doldurun, ancak kupule değil. Anaerobik bir ortam oluşturmak için "ADH", "ODC", "LDC", "URE" ve "H2S" işaretli kuyulara mineral yağ ekleyin.
İnkübasyon kutusunu kapakla kapatın ve 18 ila 24 saat boyunca 34 ila 38 santigrat derece arasında bir sıcaklıkta inkübe edin.
Kuyuları gözlemleyin ve sonuç sayfasındaki reaksiyonları not edin. En az üç testin pozitif olması şartıyla, kit ile birlikte gelen kimyasal test solüsyonlarını veya reaktifleri kullanarak renk reaksiyonlarına geçin. İyi işaretlenmiş "TDA" içine bir damla TDA reaktifi ekleyin ve iyi işaretlenmiş içine VP1 ve VP2 reaktiflerinin her birini bir damla ekleyin "VP." Üçten az test pozitif çıktıysa, bunları eklemeden önce şeritleri 24 saat daha inkübe edin. reaktifler.
Kuyularda oluşan renk değişikliklerini gözlemleyin. TDA'daki kırmızımsı kahverengi renk, pozitif reaksiyonu gösterir. Kitten reaktifleri VP1 ve VP2'ye ekledikten sonra 10 dakika bekleyin. Kırmızı veya pembe rengi pozitif, 10 dakika sonra ortaya çıkan uçuk pembe rengi negatif olarak kabul edin.
Oksidaz testini kit üreticisi tarafından belirtildiği şekilde gerçekleştirin ve sonuçlarını önceki 20 testin sonuçlarıyla birlikte kaydedin.
Bu yedi basamaklı profil numarasını, tuşlu bir telefon aracılığıyla kit üreticisinin veritabanına aktarın. Veritabanı tarafından sağlanan kimliği almayı bekleyin. Profil numarası belirli sonuçlar sağlamıyorsa, kit üreticisi tarafından belirtilen ek testleri gerçekleştirin.