Under tunnskiktskromatografi placerar en tekniker fläckar av en kemisk blandning på en platt platta belagd med ett lager av absorberande material, och placerar sedan den nedre delen av plattan i lösningsmedel. När lösningsmedlet rör sig uppåt plattan rör sig kemikalier i blandningen upp med den i olika hastigheter, så de separeras. Detta test avgör vilka kemikalier som finns i en blandning genom att jämföra okända resor med kända standarder. Resultaten kan dock påverkas av många faktorer.
TL; DR (för lång; Läste inte)
Retentionsfaktorvärden i tunnskiktskromatografi påverkas av absorbenten, lösningsmedlet, kromatografiplattan själv, appliceringsteknik och temperaturen för lösningsmedlet och plattan.
Retentionsfaktorer
Retentionsfaktorn för en kemikalie under tunnskiktskromatografi är ett mått på hur långt den rör sig uppåt plattan som svar på lösningsmedelsrörelsen. Eftersom kemikaliens absoluta rörelse beror på hur långt lösningsmedlet färdas beräknar du retentionsfaktorvärden relativt graden av lösningsmedelsrörelse. Retentionsfaktorn för en kemikalie är det vertikala avståndet som kemikalien rör sig från den plats där den var applicerades ursprungligen på plattan, dividerat med avståndet med lösningsmedlet - mätt från samma start punkt.
Tunnskiktskromatografiplatta
Själva tunnskiktskromatografiplattan kan påverka det retentionsfaktorvärde som erhålls för en given kemikalie. Tunnskiktskromatografiplattor kan beläggas med en mängd absorberande fasta ämnen; oftast kiseldioxid eller aluminiumoxid. Eftersom retentionsfaktorn är baserad på kemikaliens relativa affinitet för absorbenten jämfört med lösningsmedlet, kan förändring av absorbenten kraftigt ändra retentionsfaktorn. Tjockleken och enhetligheten hos det absorberande skiktet kan också variera från platta till platta, speciellt om de är handgjorda. Dessa faktorer kan också ändra retentionsfaktorvärdet för kemikalier.
Faktorer för kvarhållning av lösningsmedel
Eftersom lösningsmedlet bär kemikalien uppåt plattan, kommer det speciella lösningsmedlet som används också att ha en väsentlig inverkan på retentionsfaktorvärdet för kemikalien. Ett lösningsmedel som har en starkare interaktion för en viss kemikalie kommer lättare att övervinna alla kemikaliens affinitet för det absorberande skiktet, och flytta kemikalien längre under en given period av tid. Blandningar av lösningsmedel kan också ha olika effekter beroende på andelen av varje lösningsmedel.
Andra faktorer
Det finns några andra faktorer som kan påverka retentionsfaktorn i vissa fall. Lösningsmedlets och plattans temperatur kan göra små förändringar, eftersom exempelvis lösningsmedlet ofta kan bättre lösa de kemikalier som det transporterar vid högre temperaturer. Teknikern för att applicera provet på plattan kan också ändra retentionsfaktorn. Användning av för mycket prov kan leda till att stora, diffusa band av kemikalier rör sig uppåt plattan, vilket gör det svårt att noggrant mäta avståndet kemikalien har transporterats.