Kako je vzorec pripravljen za ogled pod mikroskopom?

Prej nevidno kraljestvo je bilo razkrito v zgodnjih 1600-ih letih, ko je konstrukcija prvih sestavljenih mikroskopov privedla do večjih sprememb v znanstvenem razumevanju. Osnovni sestavljeni mikroskopi so zdaj običajna oprema v medicini in naravoslovju. Prepuščena vidna svetloba sije skozi tanke pripravke za povečavo. Transmisijski in skenirajoči elektronski mikroskopi so se razvijali od leta 1931 dalje. Za ogled vzorcev ne uporabljajo optične svetlobe, temveč žarke elektronov in magnetnih polj. Priprava vzorcev predvsem za institucionalne raziskave zahteva zapleteno, drago opremo.

Obstaja več specializiranih vrst sestavljenih mikroskopov, najpogostejši pa so mikroskopi s svetlim poljem. Vzorci zanje naj bodo le nekaj mikronov, kar je debela milijoninko metra. Debelejši primerki ne prepuščajo dovolj svetlobe in ne omogočajo natančnega ostrenja. Mikroskopi s svetlim poljem imajo spodaj cev z objektivi, najbližji vzorcu, na vrhu pa očesna leča ali okular. Na nosilcu ali kupoli se vrti več objektivnih leč različnih povečav. Oder tik pod nosilcem drži drsnik vzorca, pod njim pa skozi kondenzator do vzorca zasije vir svetlobe. Sodobni sestavljeni mikroskopi lahko predmet povečajo od 1000 do 2000-krat, večji od prvotnih dimenzij.

Za majhne predmete, kot so dlake, majhne žuželke, deli žuželk ali pelodna zrna, vzorec položite neposredno na sredinski del diapozitiv iz stekla ali plastike za mikroskop z majhno količino nosilnega medija, običajno trajno izdelek iz sintetične ali naravne smole diapozitivi. Za začasne tobogane, kot je kapljica ribniške vode, ki vsebuje mikroorganizme, je voda nosilec. Vzorce zaščitite s pokrovčkom, okroglim ali kvadratnim zelo tankim kosom stekla ali plastike. Nekateri vzorci potrebujejo obarvanje z naravnimi ali sintetičnimi barvili, namenjenimi mikroskopiji, da se dobro vidijo.

Preprost način priprave tankega vzorca je stiskanje ali poravnavanje majhnega kosa tkiva pod pokrovčkom. Pogosto se v rastlinskih vzorcih vidijo kromosomi, hitro rastoča tkiva, kot so konice korenin ali prašniki delitve celic se ohranijo v fiksirnem sredstvu, nato se zmehčajo in obarvajo, da se razkrije kromosomi. Nežen pritisk gumijastega konca svinčnika, osredotočenega na prevlečen vzorec, prisili celice narazen v eno plast. V razmazih se vzorec na tanko porazdeli po enem stekelcu z drugim drsnikom kot trosilnik in nastali razmaz posuši in obarva. V medicini se vzorci telesnih tekočin, kot so kri, cerebro-spinalna tekočina ali seme, namažejo.

Bolj zapleten postopek rezanja se pojavi, ko je treba preučiti strukturo in organizacijo celotnega majhnega organizma ali koščka tkiva. Pri večini vzorcev se najprej tkivo ohrani in strdi ter voda odstrani. Nato vzorec vstavimo v tog medij, kot je vosek ali plastika, in ga z natančnim strojem, imenovanim mikrotom, narežemo na zelo tanke odseke, debele le nekaj mikronov. Vzorec je usmerjen tako, da pri rezanju daje prereze ali vzdolžne prereze. Odseki se nalepijo na stekelca mikroskopa, medij za vgradnjo se odstrani in tkiva obarvajo, da se razlikujejo strukture in celice. Kjer je hitra hitrost, na primer pri kirurških biopsijah raka, vzorce zamrznemo, narežemo z zamrzovalnim mikrotomom, obarvamo in pregledamo.