Päť krokov na prípravu agarových šikmín

Agar je rôsolovitá látka pochádzajúca z vyčistených bunkových stien červených rias. Pridáva sa do mikrobiologických médií, čo sú materiály, na ktorých sa pestujú mikroorganizmy v laboratóriách, aby látka mala pevnejšiu štruktúru. Agar nemá žiadnu výživovú hodnotu, takže keď ho vedci používajú na kultiváciu mikroorganizmov, pridávajú rôzne živiny na zvýšenie množenia baktérií v Petriho miskách alebo v skúmavkách. Keď vedci skladujú baktérie v skúmavke, označuje sa to ako sklon agaru, pretože kvapalné rastové médium tuhne, zatiaľ čo je skúmavka v naklonenej polohe. Vrchná časť so skrutkovým uzáverom na šikmej ploche zabraňuje vysušeniu agaru.

Médium je pripravené pre šikmé jedlá inak ako Petriho misky. Sterilizácia sa uskutočňuje s agarom v skúmavkách; Petriho misky sa predbežne sterilizujú a potom sa do nich naleje sterilizovaný agar. Odmerajte potrebné množstvo vody a vložte ju do Erlenmeyerovej banky. Zohrievajte ho na sporáku, kým takmer nevrie. Ak je to potrebné, pridajte ďalšie prísady a zmes pomaly a neustále miešajte, kým sa nerozpustí. Tieto zložky môžu zahrnovať hovädzí extrakt, peptón a pH pufre, v závislosti od typu kultivovaného mikroorganizmu.

Pred pridaním dehydrovaného agarového prášku ho zmiešajte s malým množstvom studenej destilovanej vody, aby ste zabránili tvorbe hrudiek. Pri pridávaní agaru do horúcej kvapaliny buďte opatrní, pretože môže peniť a hrniec pretekať. Pridajte po jednom malom množstve agaru a miešajte, aby sa agar rovnomerne rozdelil. Vypnite oheň, až keď sa zmes začne pripravovať v pare, skôr ako zovrie.

Nezakryté skúmavky vložte na stojan na skúmavky. Naplňte skúmavky prenesením asi 5 mililitrov - asi 0,17 unce alebo 1 čajovej lyžičky - roztaveného agaru z hrnca pomocou sterilnej pipety. Každá zo skúmaviek sa voľne uzavrie, pretože agar sa nebude sterilizovať, ak bude pevne uzavretý. Sterilizujte všetky skúmavky v autokláve asi 25 minút pri teplote 121 stupňov Celzia alebo 250 stupňov Fahrenheita.

Keď je agar ešte horúci, opatrne nakloňte stojan držiaci skúmavky na pevnom povrchu alebo a hrubá kniha, uistite sa, že médium vo vnútri skúmaviek je v šikmej polohe vzhľadom na test rúrky. Nechajte médium vychladnúť a stuhnúť v tomto uhle, čím sa zväčšuje povrch agaru. Po ochladení agaru dotiahnite viečka skúmaviek. Po stuhnutí agaru sú šikmé plochy pripravené na použitie. Môžu byť skladované pri izbovej teplote alebo v chladničke pre ďalšie použitie.

Naočkujte šikminu prenosom buniek očkovacou slučkou z mikroorganizmov s jednou kolóniou na platňu na povrch šikminy. Pohybujte slučkou po povrchu šikmého povrchu a znova uzatvorte skúmavky. Inkubujte šikmú plochu, kým nie je viditeľný rast, a potom vložte skúmavku do chladničky.

  • Zdieľam
instagram viewer