Mikrobiologička používa farbenie chitínom, aby pod mikroskopom jasne videla huby. Huby používajú ako štruktúrny materiál vo svojich bunkových stenách chitín, takže škvrna dobre ukazuje bunkovú stenu. Laktofenolová bavlnená modrá škvrna je najbežnejšou škvrnou pre huby. Fenol ničí mikroorganizmy a zabraňuje hubovým enzýmom rozložiť bunku. Bavlnkovo modré farbivo zmení chitín na modro. Farbenie na chitín je pomerne lacný postup s lacnými materiálmi. Môžete si buď vyrobiť vlastné farbivo, alebo kúpiť komerčne pripravený moridlo.
Pripravte si roztok laktofenolovej bavlny modrej. Odvážte 0,05 gramu bavlneného modrého farbiva pomocou citlivej váhy. Zmiešajte farbivo s 20 mililitrami destilovanej vody v skúmavke a nechajte pôsobiť cez noc.
Pred dokončením prípravy škvŕn na ďalší deň si oblečte rukavice. Vložte 20 ml kyseliny mliečnej do kadičky a zmiešajte ju s 20 g kryštálov fenolu. Miešajte, kým sa zmes nerozpustí. Pridajte do 40 ml glycerolu a premiešajte. Potom vatový modrý roztok preceďte cez kúsok filtračného papiera do kadičky a dôkladne premiešajte.
Prípadne použite komerčne pripravený zdroj škvrny. Škvrnu skladujte pri izbovej teplote.
Označte podložné sklíčko mikroskopu identifikačným menom alebo číslom vzorky. Pomocou jedného sterilného kvapkadla dajte jednu kvapku vzorky vody na stred podložného sklíčka mikroskopu. V prípade suchej vzorky vložte jednu kvapku 70-percentného alkoholového roztoku na podložné sklíčko a potom pomocou sterilnej slučky vmiešajte suchú vzorku do alkoholu.
Pomocou čistého kvapkadla preneste dve kvapky laktofenolovej bavlnenej modrej škvrny na stred podložného sklíčka. Ak používate na podložné sklíčko 70 percent alkoholu, urobte to skôr, ako sa alkohol zo podložky odparí.
Dotknite sa jedného okraja krycieho sklíčka mikroskopu jedným okrajom prípravy vlhkej vzorky. Nechajte sklíčko jemne spadnúť na preparát vzorky, aby ste pod sklíčkom nezachytili žiadne vzduchové bubliny. Zafarbená vzorka je teraz pripravená na vyšetrenie pod mikroskopom.