Postup separácie baktérií v zmiešanej kultúre

Mikrobiológovia, genetici a molekulárni biológovia používajú bakteriálne kultúry na objavovanie tajomstiev života. Mikrobiológovia študujú baktérie, aby objavili nové antibiotiká na liečbu infekcií. Genetici pomocou baktérií určujú, či môžu mať chemikálie karcinogénne vlastnosti. Molekulárni biológovia študujú biochemické dráhy bunkových procesov, aby pochopili funkcie enzýmov, ktoré máme spoločné s baktériami. Aj keď sú štúdie rôznorodé, všetky tri vedy izolujú bakteriálne kultúry rovnakou technikou: pruhovanie na agare.

Základy mikróbov

Mnoho baktérií má výrazné tvary, ktoré uľahčujú klasifikáciu.

•••Chad Baker / Photodisc / Getty Images

Mikróby sú jednobunkové organizmy, ako sú baktérie a huby. Tieto organizmy sa rýchlo množia a ľahko sa pestujú, čo ich robí obzvlášť užitočnými na štúdium. Keď sa v prírode objaví potenciálne nový mikrób, vzorka sa vloží do rastového média nazývaného „bujón“. Vývary Pozostáva zo sterilizovanej vody, solí, cukrov a ďalších výživných látok, ktoré podporia rýchly rast baktérií v banke počas inkubácia. Avšak častejšie bude vývar obsahovať viac ako jeden druh baktérií. Na izoláciu jednej baktérie vedec rozloží malú vzorku bujónu na polotuhú agarovú platňu pomocou mikrobiálnej techniky nazývanej „pruhovanie“.

Agarové platne

Nosenie rukavíc pri manipulácii s agarovými platňami zabráni kontaminácii vzorky baktériami z vašich rúk.

•••Comstock / Comstock / Getty Images

Agarové platne sú polopriehľadné, polotuhé gély pozostávajúce z morských rias a špecifických koncentrácií živín. Užitočnosť agaru spočíva v tom, že poskytuje hladký a mäkký povrch pre rastúce baktérie. Keď vedec umiestni jednu baktériu na agar, bude sa množiť tisíckrát zdvojnásobením a bude sa javiť ako malá kolónia jednotlivých buniek.

Nástroje na šírenie baktérií

Základné nástroje na šírenie bakteriálnych kolónií sa od objavenia techniky nezmenili.

•••Photos.com/Photos.com/Getty Images

Pruhovanie baktérií si vyžaduje tri nástroje: agarový tanier, liehový horák a drôtenú slučku. Agarová platňa je rastové médium, do ktorého sa baktérie prenesú po kultivácii v bujóne. Alkoholický horák je malá lampa naplnená alkoholom na sterilizáciu drôtenej slučky - dlhá, štíhla rukoväť a na jednom konci pripevnená malá slučka z ohňovzdorného drôtu. Pri prenose baktérií z bujónu na agarovú platňu bude v slučke zadržaná malá kvapka vývaru naplneného baktériami.

Proces šírenia baktérií

Cikcakový pohyb je najúčinnejším spôsobom šírenia baktérií po agarovej platni.

•••Hemera Technologies / Photos.com / Getty Images

Pruhovanie baktérií cez agarovú platňu je jednoduché, ale musíte tento krok vykonať správne, inak neizolujete samostatné kolónie. Zahrejte slučku nad liehovým horákom na sterilizáciu drôtu a potom ponorte hrot slučky do vývaru. Na štvrtinu agarovej platne prepichnite hrot slučky niekoľkokrát tam a späť. Smyčku znova sterilizujte a prúžkujte naprieč a kolmo na prvé pruhy. Pohybujte slučkou niekoľkokrát tam a späť po novom úseku platničky. Sterilizujte hrot. jedenkrát ľahko prúžkujte naprieč poslednou prúžkovanou časťou a niekoľkokrát posuňte slučku tam a späť. Pruhovanie zriedi počiatočnú kvapku bujónu do bodu, kde posledné pruhy budú obsahovať jednotlivé kolónie. Doštičku vložte do inkubátora alebo na dosku pri izbovej teplote a počkajte, kým kolónie cez noc vyrastú. Jednotlivé kolónie v poslednej sérii sa stanú izolovanými kolóniami jednej baktérie.

  • Zdieľam
instagram viewer