Вестерн-блоттинг, также называемый иммуноблоттингом, - это тест на определенный белок в смеси белков. Вестерн-блоттинг проводится после гель-электрофореза или иммуноферментного анализа (ELISA), и в нем используются антитела для идентификации конкретных белков.
Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) - это обычный тест, используемый для разделения белков для использования в Вестерн-блоттинге. Белки разделяются по весу и электрическим свойствам при движении через гелевую матрицу.
В тесте ELISA для создания тестовой поверхности используются ферменты или антитела, прикрепленные к твердой поверхности. Затем на тестовую поверхность добавляется образец. Антитела или ферменты, реагирующие или присоединяющиеся к белкам, указывают на положительный результат.
Вестерн-блоттинг проводится после гель-электрофореза. Разделенные белки переносятся (или блотируются) на нитроцеллюлозные или нейлоновые мембраны и идентифицируются специфическими антителами, которые помечены вторичным белком.
Вестерн-блоттинг используется для подтверждения положительных результатов гель-электрофореза или ELISA. Вестерн-блоттинг позволяет более точно идентифицировать белки и исключать ложноположительные результаты.