Буферные растворы устойчивы к изменениям pH, поскольку они содержат слабые кислотно-основные конъюгаты, которые нейтрализуют ионы H + и OH-. Буферные растворы состоят из слабых кислот или оснований и соли этой кислоты или основания. Выбор подходящей буферной системы зависит от диапазона pH для буферизации. Большинство биологических реакций происходит в диапазоне pH от 6 до 8. Фосфатный буферный буфер в диапазоне pH от 6,5 до 7,5. Буферы с карбоновой кислотой полезны при pH от 3 до 6. Боратные буферы работают в диапазоне pH от 8,5 до 10. Аминокислотные буферы, такие как глицин и гистидин, работают в различных диапазонах pH. Трис-буфер - одна из наиболее часто используемых буферных систем в биологических лабораториях. Расчеты для буферного раствора Трис будут использоваться в следующем примере, но методология применима к любому буферному раствору.
Используйте произведение молярности и объема конечного раствора, чтобы определить необходимое количество молей основания. Например, если необходимо 2 литра 0,1 М раствора Трис-буфера, то необходимое количество молей Трис составляет:
Рассчитайте массу необходимого буфера, умножив необходимое количество молей на молекулярную массу основания. Например, масса 0,2 моля основания Трис равна:
Растворите основу в дистиллированной воде, используя магнитную мешалку и перемешивающую плиту. Растворите его в объеме воды, немного меньшем, чем объем конечного раствора (от 950 до 975 мл на каждый литр конечного раствора). PH трис-буфера изменяется в зависимости от концентрации и требует корректировки, если используется слишком маленький начальный объем. Также лучше всего приготовить буфер при той же температуре, при которой он будет использоваться во время анализа или эксперимента, поскольку Трис имеет большие температурно-зависимые изменения pH.
Советы
- Чтобы сэкономить время при приготовлении буферного раствора, вы можете использовать предварительно приготовленные буферные концентраты с требуемым pH и разбавлять до желаемой молярности и объема. Приготовьте буферный раствор той же температуры, при которой он будет использоваться, чтобы избежать значительных изменений pH. Избегайте трудоемкой корректировки pH, титруйте только после разбавления до желаемой концентрации. Растворение в слишком маленьком объеме приведет к повторному титрованию.
Предупреждения
- Соблюдайте осторожность при работе с кислотами и щелочами. Надевайте защитные очки.
об авторе
Карла Булианна - биолог-эволюционист по образованию и писатель-фрилансер по увлечению. Помимо написания статей для Demand Studios и eHow, она также пишет в журнале «Воспитание одаренных детей» на сайте Suite101.com. Она с энтузиазмом исследует новые темы посредством обширных исследований.
Фото Кредиты
Фото любезно предоставлено Эмми П. @ morgueFile.com