Когда вы проверяете влияние pH на активность ферментов, вы должны изменять pH. Тем не менее, вы можете сделать это как в хорошем, так и в плохом смысле. Имейте в виду, какие дополнительные факторы могут влиять на изменение pH. В противном случае полученные результаты могут быть связаны не с изменением pH, а с каким-то другим фактором. Знание того, как правильно изменять pH и какие факторы влияют на pH эксперимента, поможет вам получить хорошие результаты и понять, почему ваши результаты могут не совсем соответствовать вашим ожиданиям.
Измените только одну вещь
При тестировании влияния pH на активность ферментов меняйте только pH, сохраняя при этом другие факторы постоянными. Эти другие факторы включают концентрацию фермента, концентрацию субстрата и температуру. Факторы, которые остаются постоянными, называются контрольными переменными. Контрольные переменные позволяют сделать вывод, что результаты по активности фермента, полученные в вашем эксперименте, связаны с изменением pH, независимой переменной. Знать, какие факторы не следует изменять в эксперименте, так же важно, как и знать, какой фактор следует изменить. в противном случае будет сложно сделать вывод, действительно ли результаты связаны с тем, что было проверено.
Выберите одну кислоту или одну основу
PH раствора можно изменить, растворяя в воде различные количества кислоты или основания. Один из способов проверить влияние pH на активность ферментов - постепенно добавлять капли сильной кислоты или сильного основания. в раствор, содержащий фермент, а затем наблюдайте за точкой, в которой активность фермента замедляется или останавливается. Кислота определяется как соединение, которое отдает ион водорода, называемое протоном (H +), а основание определяется как соединение, которое отдает ион гидроксида (-OH). У разных кислот и оснований разное количество протонов или гидроксид-ионов. Не все протоны или гидроксид-ионы немедленно передаются при добавлении кислоты или основания в раствор, но количество переданных протонов или гидроксид-ионов изменяет pH с разной скоростью. Таким образом, рекомендуется изменять pH в эксперименте с ферментами, используя только один тип кислоты или один тип основания. В противном случае непреднамеренно добавляются другие переменные.
Ткани также изменяют pH
Некоторые лабораторные эксперименты, изучающие активность ферментов, включают измельчение свежей ткани, чтобы высвободить ферменты из клеток, а затем добавление субстрата для измерения активности фермента. Свежая ткань содержит кровь. Из-за присутствия в крови ферментов, которые превращают растворенный в крови углекислый газ в угольную кислоту, сама ткань может влиять на pH. Таким образом, в экспериментах, в которых задействована активность ферментов в свежих тканях, перед измельчением ткани полезно смыть кровь в стакане с холодной водой. Это сведет к минимуму непреднамеренное изменение pH из-за ткани, так что целенаправленное изменение pH может быть изучено.
Сохраняйте размеры одинаковыми
Как обсуждалось выше, концентрация фермента является контрольным фактором, который не следует изменять при тестировании влияния pH на активность фермента. Однако экспериментальные процедуры по-прежнему изменяют концентрацию ферментов незаметными способами. Если вы используете чистый раствор ферментов, то сохраняйте постоянную концентрацию ферментов. Однако в экспериментах, в которых фермент взят из свежей ткани, такой как кусочки картофеля, кусочки растений или кусочки печени, размер кусочков изменяет количество фермента в каждой пробирке. Таким образом, будет полезно разрезать кусочки ткани как можно более равномерно. Это еще один пример того, как знание того, что не следует менять и почему трудно полностью избежать изменений, помогает интерпретировать результаты изменения такого фактора, как pH.