Oamenii de știință și tehnicienii trebuie adesea să calculeze concentrația de celule dintr-o suspensie. De exemplu, atunci când un pacient își extrage sângele la cabinetul unui medic, laboratorul poate folosi anumite metode pentru a căuta cantitatea de celule albe din sânge într-un anumit volum de sânge. Acest lucru oferă medicului o mulțime de informații despre starea de sănătate a pacientului ei, în special sistemul său imunitar și dacă combate o infecție sau o altă boală. Testele de acest fel pot căuta multe alte celule din sânge, precum și lichidul coloanei vertebrale și alte fluide corporale, cum ar fi numărul de celule de spermă din material seminal în scopuri de fertilitate. Oamenii de știință calculează, de asemenea, concentrațiile celulare de bacterii, drojdii și alte microorganisme în numeroase scopuri, de la cercetarea ecologică la tehnologiile industriale. Una dintre cele mai comune tehnici este, de asemenea, predată în multe clase de biologie a colegiului și folosește un dispozitiv numit cameră de numărare.
Înainte ca suspensia celulară să poată intra în camera de numărare, ar putea fi necesară diluarea, deoarece ar putea conține mii sau milioane de celule. În acest caz, celulele nu pot fi numărate în mod rezonabil. Pentru a dilua proba, utilizați o pipetă sterilă pentru a plasa zece microlitri de soluție celulară într-o eprubetă care conține 90 microlitri de diluant. Tipul de diluant va depinde de tipul de celulă. Se amestecă bine. Această soluție este acum de zece ori mai diluată decât proba inițială, deci factorul său de diluare este 10-1. Eticheteaza-l. Repetați acest lucru de mai multe ori, folosind de fiecare dată o pipetă sterilă, până când soluția este suficient de diluată. Dacă ați diluat-o a doua oară, a doua eprubetă a fost de 100 de ori mai diluată decât soluția inițială, deci factorul de diluare a fost de 10-2 și așa mai departe.
Poate fi necesar să încercați mai multe diluții pentru a determina factorul de diluare potrivit pentru camera de numărare. O cameră de numărare este practic o cutie foarte mică, clară, dreptunghiulară, cu o adâncime precisă și o grilă precisă inscripționată deasupra. Este, de asemenea, cunoscut sub numele de hemocitometru sau, uneori, hemacitometru. Scopul este ca suspensia să fie suficient de diluată încât, atunci când este privită în camera de numărare, să nu se suprapună celule și să fie distribuite pe tot grila într-un mod uniform. Pipetați suspensia diluată care conține celulele în puțul din camera de numărare, unde se va așeza în camera rețelei prin acțiune capilară. Așezați camera de numărare pe stadiul microscopului și vizualizați-o la putere redusă.
Grila conține pătrate formate din pătrate chiar mai mici. Selectați aproximativ patru sau cinci pătrate, sau oricâte ar trebui să numărați cel puțin 100 de celule, într-un model pe care îl alegeți, cum ar fi cele patru colțuri și un pătrat central. Dacă celulele sunt mari, acestea ar putea fi pătratele mari, dar dacă celulele sunt mici, puteți alege în schimb pătratele mai mici.
Volumul specific al fiecărui pătrat al grilei poate varia în funcție de producătorul camerei de numărare, dar adesea, adâncimea camerei este de 0,1 milimetri, aria pătratelor mari este de 1 milimetru pătrat, iar aria pătratelor mai mici este 0,04 pătrat milimetri. Pătratele mai mari, atunci, au un volum de 0,1 milimetri cubi. Pentru acest exemplu, presupuneți că ați numărat în total 103 celule în cinci pătrate și că ați diluat proba inițială până când factorul de diluție a fost 10-2.
Dacă fiecare pătrat de rețea are un volum de 0,1 milimetri cubi și s-au numărat cinci, atunci volumul total al camerei care a fost numărată a fost de 0,5 milimetri cubi și au existat 103 celule. Dublat pentru a face 1 milimetru cub ar face 206 celule. Un centimetru cub este echivalent cu 1 mililitru, ceea ce reprezintă o măsurătoare utilă pentru lichide. Există 1.000 de milimetri cubi într-un centimetru cub. Prin urmare, dacă ar fi existat un centimetru cub sau un mililitru de suspensie, ați fi numărat 206.000 (206 x 1.000) celule. Așa arată ca o ecuație:
Volumul pătratului rețelei × numărul de pătrate numărate = volumul total al suspensiei numărate
Numărul de celule ÷ volumul suspensiei numărate = numărul de celule pe milimetri cubi
Numărul de celule pe milimetri cub × 1000 = numărul de celule pe mililitru
Va trebui să țineți cont de orice diluare efectuată pentru a face soluția inițială numărabilă la microscop. În acest exemplu, factorul de diluare este 10-2. Pentru a calcula concentrația inițială a soluției:
Numărul de celule per mililitru ÷ factor de diluție = concentrația celulei
Pentru acest exemplu, numărul de celule pe mililitru este de 206.000 și împărțind acest lucru la 10-2 (0,01) dă o concentrație celulară de 20,600,000 celule pe mililitru în proba inițială.