Microbiologia studiază organismele microscopice și are nevoie de modalități de a distinge vizual diferite tipuri. Microbiologii folosesc proceduri de colorare care adaugă culoare diferitelor tipuri de organisme. Aceste pete sunt substanțe chimice de diferite culori, dar aceste substanțe chimice nu se lipesc ele însele de organisme. Astfel, un microbiolog adaugă un mordant la pată. Un mordant este definit în mod clasic ca un ion care leagă un colorant chimic și îl menține, astfel încât colorantul să rămână blocat pe organism. Cu toate acestea, orice substanță chimică care păstrează un colorant în loc poate fi considerată, de asemenea, ca un mordant.
TL; DR (Prea lung; Nu am citit)
Un mordant „fixează” vopseaua de organism, astfel încât vopseaua să fie menținută în loc.
Podul
În microbiologie, un mordant este un compus utilizat pentru a ține apăsate moleculele unei pete pe un microorganism. Definite clasic, mordanții sunt de obicei ioni, cum ar fi ioni metalici sau ioni halogenuri, dar pot fi orice moleculă care are scopul de a ține apăsat un colorant. Cu toate acestea, o moleculă numită fenol este un mordant neionic care este discutat mai jos. Unii mordanți leagă atât colorantul, cât și proteinele de microorganism. Majoritatea mordanților sunt ioni deoarece sarcina electrică a ionului atrage sarcina electrică a unui colorant chimic. Astfel, atunci când ionul leagă colorantul, formează un complex mare care precipită - ceea ce înseamnă că devin un solid și nu mai sunt dizolvate în soluție. Mordanții rețin sau cântăresc vopseaua astfel încât să nu se spele în timpul restului procedurii de colorare. Spălarea se face astfel încât să fie vizualizate doar adevăratele regiuni de colorare.
Colorarea Gram
Un tip foarte comun de colorare în microbiologie este colorarea Gram. Bacteriile au pereți celulari care înconjoară membrana plasmatică și le oferă protecție fizică. Pata de Gram distinge între bacteriile Gram-pozitive și Gram-negative. Bacteriile Gram-pozitive au pereți celulari mai groși decât bacteriile Gram-negative. Colorarea Gram se realizează atunci când colorantul chimic violet cristal este amestecat cu iodul mordant. Iodul și cristalul violet formează un complex mare care precipită din soluție. În timpul procedurii de colorare, bacteriile sunt scăldate în alcool, ceea ce determină micșorarea pereților celulari. Această contracție prinde complexul iod-cristal violet din peretele celular, ceea ce conferă bacteriilor Gram-pozitive o culoare violet. .
Colorarea hematoxilinei de fier
O altă pată obișnuită în microbiologie este pata de hematoxilină de fier. Hematoxilina colorează ADN-ul în nucleele microorganismelor. Hematoxilina de fier vizualizează paraziții în materia fecală a oamenilor. Fierul este mordantul care împiedică spălarea hematoxlinei în timpul procesului de colorare. La hematoxilină se adaugă ioni de fier sub formă de sulfat de amoniu feros și sulfat de amoniu feric. Fier înseamnă că atomul de fier are sarcină de +2, iar feric înseamnă că ionul de fier ca sarcină de +3.
Pata acidă rapidă
Colorarea acidă rapidă este utilizată pentru a detecta prezența micobacteriilor în spută, care este un amestec de salivă și mucus care este tusit. Colorantul chimic fuschin colorează aceste bacterii, dar fenolul - sub formă de acid carbolic - este substanța chimică care păstrează fuschina în peretele celular al micobacteriilor. Fuschin se dizolvă bine în fenol, dar nu în apă sau alcool. La rândul său, fenolul se amestecă bine cu peretele celular ceros al micobacteriilor. Astfel, fenolul servește ca un taxi care transportă fuschina în peretele celular. Fenolul nu este un ion metalic sau halogen, dar servește ca mordant, deoarece menține vopseaua în loc.