Mikrobiolodzy, genetycy i biolodzy molekularni wykorzystują kultury bakterii do odkrywania tajemnic życia. Mikrobiolodzy badają bakterie, aby odkryć nowe antybiotyki do leczenia infekcji. Genetycy wykorzystują bakterie do określenia, czy chemikalia mogą mieć właściwości rakotwórcze. Biolodzy molekularni badają biochemiczne szlaki procesów komórkowych, aby zrozumieć funkcje enzymów, które mamy wspólne z bakteriami. Niezależnie od tego, jak różne są badania, wszystkie trzy nauki izolują kultury bakteryjne przy użyciu tej samej techniki: posiewu na płytce agarowej.
Podstawy mikrobów
•••Chad Baker/Photodisc/Getty Images
Mikroby to organizmy jednokomórkowe, takie jak bakterie i grzyby. Organizmy te szybko się rozmnażają i są łatwe w uprawie, co czyni je szczególnie przydatnymi do badań. Kiedy w przyrodzie zostanie odkryty potencjalnie nowy drobnoustrój, próbkę umieszcza się w pożywce wzrostowej zwanej „bulionem”. Buliony składają się ze sterylizowanej wody, soli, cukrów i innych składników odżywczych, które będą promować szybki wzrost bakterii w kolbie podczas inkubacja. Jednak najczęściej bulion zawiera więcej niż jeden rodzaj bakterii. Aby wyizolować pojedynczą bakterię, naukowiec rozprowadza małą próbkę bulionu na półstałej płytce agarowej przy użyciu techniki mikrobiologicznej zwanej „smużeniem”.
Płytki agarowe
•••Comstock/Comstock/Getty Images
Płytki agarowe są półprzezroczystymi, półstałymi żelami składającymi się z wodorostów i określonych stężeń składników odżywczych. Przydatność agaru polega na tym, że zapewnia gładką, miękką powierzchnię dla rosnących bakterii. Kiedy naukowiec umieści pojedynczą bakterię na agarze, będzie się ona rozmnażać tysiące razy i pojawi się jako mała kolonia pojedynczych komórek.
Narzędzia do smugowania bakterii
•••Photos.com/Photos.com/Getty Images
Pasmowanie bakterii wymaga trzech narzędzi: płytki agarowej, palnika na alkohol i drucianej pętli. Płytka agarowa jest pożywką wzrostową, na którą przenoszone są bakterie po wzroście w bulionie. Alkoholowy palnik to mała, wypełniona alkoholem lampa do sterylizacji drucianej pętli — długiej, smukłej rączki z małą pętlą z ognioodpornego drutu przymocowaną na jednym końcu. Podczas przenoszenia bakterii z bulionu na płytkę agarową pętla będzie zawierała maleńką kroplę bulionu wypełnionego bakteriami.
Proces smugowania bakterii
•••Hemera Technologies/Photos.com/Getty Images
Rozprowadzanie bakterii po płytce agarowej jest proste, ale musisz wykonać ten krok poprawnie lub nie wyizolujesz oddzielnych kolonii. Podgrzej pętlę nad palnikiem alkoholowym, aby wysterylizować drut, a następnie zanurz końcówkę pętli w bulionie. Poprowadź końcówkę ezy w tę iz powrotem kilka razy na jednej czwartej płytki agarowej. Ponownie wysterylizuj pętlę i wykonaj smugę w poprzek i prostopadle do pierwszych smug. Przesuń kilka razy pętlę w tę iz powrotem nad nową częścią płytki. Wysterylizuj końcówkę. przeciągnij lekko przez ostatnią smugę jeden raz i kilkakrotnie przesuń pętlę w tę i z powrotem. Smużenie polega na rozcieńczeniu początkowej kropli bulionu do punktu, w którym ostatnie smugi będą zawierały pojedyncze kolonie. Umieść płytkę w inkubatorze lub na blacie w temperaturze pokojowej i poczekaj na wzrost kolonii przez noc. Pojedyncze kolonie w ostatniej serii staną się izolowanymi koloniami pojedynczej bakterii.