Kiedy testujesz wpływ pH na aktywność enzymów, powinieneś zmieniać pH. Możesz to jednak zrobić w dobry lub zły sposób. Należy pamiętać, jakie dodatkowe czynniki mogą zakłócać działanie zmiennego pH. W przeciwnym razie uzyskane wyniki mogą nie wynikać ze zmiany pH, ale z innego czynnika. Wiedza o tym, jak prawidłowo zmieniać pH i jakie czynniki zakłócają pH eksperymentu, pomoże Ci uzyskać dobre wyniki i zrozumieć, dlaczego wyniki mogą nie być dokładnie takie, jakich oczekiwałeś.
Zmień tylko jedną rzecz
Podczas testowania wpływu pH na aktywność enzymów, zmieniaj tylko pH, utrzymując inne czynniki na stałym poziomie. Te inne czynniki obejmują stężenie enzymu, stężenie substratu i temperaturę. Czynniki, które pozostają stałe, nazywane są zmiennymi kontrolnymi. Zmienne kontrolne pozwalają stwierdzić, że wyniki dotyczące aktywności enzymów uzyskane w twoim eksperymencie wynikają ze zmiany pH, zmiennej niezależnej. Wiedza o tym, jakich czynników nie zmieniać w eksperymencie, jest tak samo ważna jak wiedza o tym, który czynnik należy zmieniać, w przeciwnym razie trudno będzie stwierdzić, czy wyniki rzeczywiście wynikają z jednej rzeczy, która była przetestowany.
Wybierz jeden kwas lub jedną zasadę
pH roztworu można zmienić, rozpuszczając różne ilości kwasu lub zasady w wodzie. Jednym ze sposobów sprawdzenia wpływu pH na aktywność enzymów jest stopniowe dodawanie kropli mocnego kwasu lub mocnej zasady do roztworu zawierającego enzym, a następnie obserwuj punkt, w którym aktywność enzymu zwalnia lub zatrzymuje się. Kwas definiuje się jako związek, który oddaje jon wodorowy, zwany protonem (H+), a zasadę definiuje się jako związek, który oddaje jon wodorotlenowy (-OH). Różne kwasy i zasady mają różną liczbę protonów lub jonów wodorotlenowych do oddania. Nie wszystkie protony lub jony wodorotlenkowe są natychmiast oddawane po dodaniu kwasu lub zasady do roztworu, ale liczba oddanych protonów lub jonów wodorotlenowych zmienia pH w różnym tempie. Dlatego dobrym pomysłem jest zmienianie pH w eksperymencie enzymatycznym przy użyciu tylko jednego rodzaju kwasu lub jednego rodzaju zasady. W przeciwnym razie nieumyślnie dodawane są inne zmienne.
Tkanki również zmieniają pH
Niektóre eksperymenty laboratoryjne, które badają aktywność enzymów, obejmują mielenie świeżej tkanki w celu uwolnienia enzymów z komórek, a następnie dodanie substratu w celu pomiaru aktywności enzymu. Świeża tkanka zawiera krew. Ze względu na obecność we krwi enzymów, które zmieniają dwutlenek węgla rozpuszczony we krwi w kwas węglowy, sama tkanka może wpływać na pH. Tak więc w eksperymentach, które obejmują aktywność enzymu w świeżej tkance, pomocne jest wypłukanie krwi w zlewce z zimną wodą przed zmieleniem tkanki. Zminimalizuje to niezamierzoną zmianę pH spowodowaną przez tkankę, tak aby można było badać celową zmianę pH.
Zachowaj takie same rozmiary
Jak omówiono powyżej, stężenie enzymu jest czynnikiem kontrolnym, którego nie należy zmieniać podczas testowania wpływu pH na aktywność enzymu. Jednak procedury doświadczalne wciąż z natury zmieniają stężenie enzymu w subtelny sposób. Jeśli używa się czystego roztworu enzymów, należy utrzymywać stałe stężenie enzymu. Jednak w doświadczeniach, w których enzym pochodzi ze świeżej tkanki, takiej jak kawałki ziemniaków, kawałki roślin lub kawałki wątroby, wielkość kawałków zmienia ilość enzymu w każdej probówce. W związku z tym pomocne będzie cięcie kawałków tkanki tak równomiernie, jak to możliwe. To kolejny przykład tego, jak wiedza o tym, czego nie zmieniać i dlaczego trudno nie całkowicie uniknąć zmian, pomaga interpretować wyniki różnych czynników, takich jak pH.