Jak zidentyfikować Enterobacter Aerogenes API 20E?

Enterobacter aerogenes i inne gatunki Enterobacteriaceae można łatwo zidentyfikować za pomocą zestawu API-20E. Ten zestaw, wyprodukowany przez bioMeriuex Inc., zawiera 20 miniprobówek lub studzienek do testu. Test polega na zaszczepieniu czystej zawiesiny bakteryjnej do dołków testowych i odczytaniu zachodzących reakcji barwnych. Identyfikacja polega na zamianie wyników tych reakcji barwnych na siedmiocyfrowy kod znany jako wskaźnik profilu analitycznego. Dopasowanie tego kodu do bazy danych producenta zapewnia identyfikację organizmu.

Otwórz ampułkę zawierającą 5 ml pożywki chlorku sodu 0,85%. Za pomocą pipety usuń pojedynczą kolonię z 18-24-godzinnej płytki izolacyjnej i dodaj ją do ampułki. Wymieszać do uzyskania jednorodnej zawiesiny. Użyj tej zawiesiny, gdy tylko skończysz ją przygotowywać.

Przygotuj pudełko do inkubacji składające się ze studzienek o strukturze plastra miodu na tacy wyposażonej w pokrywkę. Otwórz pudełko i dodaj 5 ml wody demineralizowanej lub destylowanej do dołków tacki. Rozpakuj pasek dostarczony w zestawie testowym API 20E i umieść go w pudełku inkubacyjnym.

Napełnij probówkę i miseczkę dołków oznaczonych „ŻEL”, „VP” i „CIT” przygotowaną zawiesiną. W pozostałych studzienkach napełnić probówkę zawiesiną bakterii, ale nie miseczkę. Dodaj olej mineralny do dołków oznaczonych „ADH”, „ODC”, „LDC”, „URE” i „H2S”, aby stworzyć środowisko beztlenowe.

Przykryj pudełko inkubacyjne pokrywką i inkubuj w temperaturze od 34 do 38 stopni Celsjusza przez 18 do 24 godzin.

Obserwuj dołki i zanotuj reakcje na karcie wyników. Pod warunkiem, że co najmniej trzy testy są pozytywne, przejdź do reakcji barwnych przy użyciu chemicznych roztworów testowych lub odczynników dostarczonych z zestawem. Dodaj jedną kroplę odczynnika TDA do dobrze oznaczonego „TDA” i upuść każdy z odczynników VP1 i VP2 do dobrze oznaczonego „Wiceprezes”. Jeśli mniej niż trzy testy dały wynik pozytywny, inkubuj paski przez kolejne 24 godziny przed ich dodaniem odczynniki.

Obserwuj zmiany koloru zachodzące w dołkach. Czerwonawo-brązowy kolor w TDA wskazuje na reakcję pozytywną. Po dodaniu odczynników z zestawu do VP1 i VP2 odczekaj 10 minut. Potraktuj czerwony lub różowy kolor jako pozytywny, a jasnoróżowy kolor pojawiający się po 10 minutach jako negatywny.

Wykonaj test na oksydazę zgodnie z zaleceniami producenta zestawu i zapisz jego wyniki wraz z wynikami poprzednich 20 testów.

Wprowadź ten siedmiocyfrowy numer profilu do bazy danych producenta zestawu za pomocą telefonu z wybieraniem tonowym. Poczekaj na otrzymanie identyfikacji dostarczonej przez bazę danych. Jeśli numer profilu nie zapewnia konkretnych wyników, wykonaj dodatkowe testy określone przez producenta zestawu.

  • Dzielić
instagram viewer