Wetenschappers en technici moeten vaak de concentratie van cellen in een suspensie berekenen. Wanneer een patiënt bijvoorbeeld zijn bloed laat afnemen bij een dokterspraktijk, kan het laboratorium bepaalde methoden gebruiken om te kijken naar de hoeveelheid witte bloedcellen in een bepaald volume bloed. Dit geeft de arts veel informatie over de gezondheid van haar patiënt, met name zijn immuunsysteem en of hij een infectie of een andere ziekte bestrijdt. Tests zoals deze kunnen veel andere cellen in het bloed zoeken, evenals ruggenmergvocht en andere lichaamsvloeistoffen, zoals het aantal zaadcellen in sperma voor vruchtbaarheidsdoeleinden. Wetenschappers berekenen ook celconcentraties van bacteriën, gisten en andere micro-organismen voor tal van doeleinden, variërend van ecologisch onderzoek tot industriële technologieën. Een van de meest voorkomende technieken wordt ook onderwezen in veel biologielessen op de universiteit, en het maakt gebruik van een apparaat dat een telkamer wordt genoemd.
Voordat de celsuspensie in de telkamer kan, moet deze mogelijk worden verdund omdat deze duizenden of miljoenen cellen kan bevatten. In dat geval zijn de cellen redelijkerwijs niet te tellen. Om het monster te verdunnen, gebruikt u een steriele pipet om tien microliter van de celoplossing in een reageerbuis met 90 microliter van een verdunningsmiddel te plaatsen. Het type verdunningsmiddel hangt af van het type cel. Meng het goed. Deze oplossing is nu tien keer meer verdund dan het oorspronkelijke monster, dus de verdunningsfactor is 10-1. Label het. Herhaal dit meerdere keren, telkens met een steriele pipet, totdat de oplossing voldoende verdund is. Als je het een tweede keer verdunde, was de tweede reageerbuis 100 keer meer verdund dan de oorspronkelijke oplossing, dus de verdunningsfactor was 10-2 enzovoorts.
Mogelijk moet u meerdere verdunningen proberen om de juiste verdunningsfactor voor de telkamer te bepalen. Een telkamer is in feite een zeer kleine, doorzichtige, rechthoekige doos met een precieze diepte en een nauwkeurig raster aan de bovenkant. Het is ook bekend als een hemocytometer, of soms een hemacytometer. Het doel is dat de suspensie voldoende verdund is zodat wanneer deze in de telkamer wordt bekeken, er geen cellen overlappen en ze op een uniforme manier over het raster worden verdeeld. Pipetteer de verdunde suspensie die de cellen bevat in de put in de telkamer, waar deze door capillaire werking in de roosterkamer zal bezinken. Plaats de telkamer op de microscooptafel en bekijk deze op laag vermogen.
Het raster bevat vierkanten die zijn gemaakt van nog kleinere vierkanten. Selecteer ongeveer vier of vijf vierkanten, of hoeveel je er ook nodig hebt om minstens 100 cellen te tellen, in een patroon naar keuze, zoals de vier hoeken en een vierkant in het midden. Als de cellen groot zijn, kunnen dit de grote vierkanten zijn, maar als de cellen klein zijn, kunt u in plaats daarvan de kleinere vierkanten kiezen.
Het specifieke volume van elk rastervierkant kan per telkamerfabrikant verschillen, maar vaak is de diepte van de kamer 0,1 millimeter, de oppervlakte van de grote vierkanten is 1 vierkante millimeter en de oppervlakte van de kleinere vierkanten is 0,04 vierkant millimeter. De grotere vierkanten hebben dan een volume van 0,1 millimeter in blokjes. Neem voor dit voorbeeld aan dat je in totaal 103 cellen in vijf vierkanten hebt geteld en dat je het eerste monster hebt verdund tot de verdunningsfactor 10 was.-2.
Als elk rastervierkant een volume heeft van 0,1 kubieke millimeter en er werden er vijf geteld, dan was het totale volume van de getelde kamer 0,5 kubieke millimeter en waren er 103 cellen. Verdubbeld om het 1 kubieke millimeter te maken, zou het 206 cellen zijn. Een kubieke centimeter komt overeen met 1 milliliter, wat een nuttige maat is voor vloeistoffen. Er zijn 1.000 kubieke millimeter in een kubieke centimeter. Als er dus een kubieke centimeter of een milliliter suspensie was geweest, zou je 206.000 (206 x 1.000) cellen hebben geteld. Dit is hoe het eruit ziet als een vergelijking:
Volume van rastervierkant × aantal getelde vierkanten = totaal volume getelde suspensie
Aantal cellen ÷ volume getelde suspensie = aantal cellen per millimeter in blokjes
Celgetal per millimeter in blokjes × 1000 = celgetal per milliliter
U moet rekening houden met elke verdunning die is uitgevoerd om de initiële oplossing onder de microscoop telbaar te maken. In dit voorbeeld is de verdunningsfactor 10-2. Om de beginconcentratie van de oplossing te berekenen:
Aantal cellen per milliliter ÷ verdunningsfactor = celconcentratie
Voor dit voorbeeld is het aantal cellen per milliliter 206.000, en dat te delen door 10-2 (0,01) geeft een celconcentratie van 20.600.000 cellen per milliliter in het initiële monster.