De Western blot-test, ook wel immunoblotting genoemd, is een test voor een specifiek eiwit in een eiwitmengsel. De Western-blot-test wordt uitgevoerd na gelelektroforese of een enzym-linked immunosorbent assay (ELISA)-test en gebruikt antilichamen om specifieke eiwitten te identificeren.
Natriumdodecylsulfaat-polyacrylamidegelelektroforese (SDS-PAGE) is een veel voorkomende test die wordt gebruikt om eiwitten te scheiden voor gebruik in de Western-blot. De eiwitten worden gescheiden door gewicht en elektrische eigenschappen terwijl ze door een gelmatrix bewegen.
De ELISA-test maakt gebruik van enzymen of antilichamen die aan een vast oppervlak zijn bevestigd om het testoppervlak te creëren. Vervolgens wordt een monster aan het testoppervlak toegevoegd. Antilichamen of enzymen die reageren of zich hechten aan eiwitten duiden op een positief resultaat.
De Western-blot-test wordt uitgevoerd na de gelelektroforese. De gescheiden eiwitten worden overgebracht (of geblot) op nitrocellulose- of nylonmembranen en geïdentificeerd door specifieke antilichamen die zijn gelabeld door een secundair eiwit.
De Western blot-test wordt gebruikt om positieve resultaten van gelelektroforese of ELISA-tests te bevestigen. De Western Blot-test kan eiwitten specifieker identificeren en kan valse positieven uitsluiten.