Of u wel of niet moet ontgassen of ontluchten, uw bufferoplossing hangt af van de toepassing. Als de aanwezigheid van overtollig zuurstof in de buffer de gewenste chemische reactie beïnvloedt, of als: de vorming van luchtbellen in de oplossing zal de aflezingen of de stroom beïnvloeden, u zult uw moeten ontgassen buffer. In dit artikel wordt ervan uitgegaan dat u uw buffer al hebt voorbereid en indien nodig hebt gefilterd.
Ontgassen door middel van vacuüm is de meest gebruikelijke manier om lucht uit een bufferoplossing te verwijderen. Plaats uw oplossing in een zijarmkolf met een roerstaafje en gebruik een rubberen stop om de bovenkant af te sluiten. Plaats de kolf op een roerplaat en zet de plaat aan zodat de roerstaaf op gemiddelde snelheid draait. Dit helpt om lucht uit de oplossing te verwijderen. Sluit de slang voor het vacuümsysteem aan op de zijarm van de kolf en zet het vacuüm op een laag tempo aan. Laat de oplossing minstens een uur ontgassen.
Met dezelfde opstelling met de zijarmkolf en vacuüm, kunt u de roerplaat en roerstaaf weglaten en de kolf in een ultrasoonapparaat plaatsen. De sonicator maakt gebruik van geluidsgolven die meer lucht uit uw oplossing laten ontsnappen dan de roerstaaf kan.
Heliumsparging - ook wel heliumborrelen of inert gaszuivering genoemd - is een van de meest effectieve manieren om uw buffer te ontgassen als u een heliumlijn in uw laboratorium heeft. Plaats een borrelfrit - een connector met aan het einde een steenachtig filter - aan het einde van je heliumlijn en plaats de lijn en frit in je oplossing. Zet het helium ongeveer vijf minuten onder zeer lage druk aan, zodat het helium de zuurstof kan verwijderen. Dit moet mogelijk dagelijks worden herhaald.
Sommige chromatografiesystemen hebben een inline oplossingsontgasser. Het systeem verwijdert het gas uit uw buffer voordat het door de chromatografiekolom wordt gestuurd. U hoeft uw oplossing niet vooraf te ontgassen. Als u echter basisruis op uw chromatogram ervaart, moet u overwegen om naast het gebruik van de inline-ontgasser ook een van de bovenstaande methoden te gebruiken.