Galvenais iemesls, kāpēc jūs notraipāt paraugu pirms ievietošanas mikroskopā, ir labāk to apskatīt, taču krāsošana daudz vairāk nekā vienkārši izceļ šūnu kontūras. Daži traipi var iekļūt šūnu sienās un izcelt šūnu komponentus, un tas var palīdzēt zinātniekiem vizualizēt vielmaiņas procesus. Traipi arī palīdz atšķirt dzīvas šūnas no mirušām. Turklāt krāsošana ļauj zinātniekiem saskaitīt noteikta veida šūnu skaitu noteiktā biomasā. Pastāv divdesmit vai vairāk dažādu veidu traipi, un katram no tiem ir savs mērķis.
TL; DR (pārāk ilgi; Nelasīju)
Krāsošanas galvenais mērķis ir izcelt šūnas un šūnu daļas. Pastāv vairāk nekā 20 dažāda veida traipi, un jūsu izmantotā traipa veids ir atkarīgs no tā, ko meklējat.
Traipu veidi
Traipa izvēle ir atkarīga no tā, ko meklējat. Ne visi traipi ir piemēroti dzīvām šūnām, bet tie, kas ietver Bismarka brūno, toluolsarkano, Nīlas zilo un Nīlas sarkano krāsu, un daži fluorescenti, ko izmanto, lai izceltu DNS. Daži traipi izceļ sporas, daži atklāj lipīdus un olbaltumvielas, bet citi maina krāsu cietes klātbūtnē. Pārbaudes mērķis nosaka labāko izmantojamo traipu veidu. Piemēram, ārsts, kurš veic PAP uztriepi, izmantotu Eosin Y. Tā ir skāba fluorescējoša krāsa, kas, saskaroties ar sarkanajām asins šūnām, citoplazmu un šūnu membrānām, kļūst sarkana. To lieto arī asins smadzeņu pārbaudei.
Dažos gadījumos izmeklētājs var izmantot vairāk nekā vienu traipu. Piemēram, hematoksilīns ir traips, kas šūnu kodolus padara zilus. Lietojot kopā ar eozīnu, kas pārējās šūnas daļas padara sarkanas vai sārtas, tas nodrošina spēcīgāku kontrastu un atvieglo kodolu diferenciāciju. PAP uztriepes un asins smadzeņu paraugus ir vieglāk pārbaudīt, ja šos divus traipus lieto kopā.
Grama traips: Slimnīcas darbinieki izmanto Grama traipu, lai identificētu kaitīgās baktērijas. Šī faktiski ir krāsvielu sērija, kurai ir atšķirīga ietekme uz dažāda veida baktērijām un kas ārstiem piešķir svarīgu diagnostikas rīku. Grama traips ir trīsdaļīgs process. Pirmajā tiek pievienots Hakera kristālviolets, kas visas baktērijas iekrāso viendabīgā violetā krāsā. Nākamajā posmā pievieno joda traipu, kas liek krāsai pielipt grampozitīvām šūnām, kas galvenokārt ir Staphylococcus un Streptococcus. Traipu nomazgā, atstājot gram-pozitīvās šūnas ar izteiktu violetu krāsu; pēc tam tiek ievadīts trešais traips - Safranīns O, lai uzlabotu kontrastu starp gramnegatīvām baktērijām un pārējo priekšmetstiklā esošo materiālu.
Krāsošanas procedūra
Sagatavojot paraugu uz priekšmetstikliņa, jūs varat to piestiprināt sausā vai mitrā veidā, varat sagriezt plānā daļā vai arī iesmērēt. Izmantojot traipu, parastā procedūra ir parauga uzstādīšana uz slapja ceļa, kas nozīmē ūdens piles ievietošanu uz priekšmetstikliņa, parauga ievietošanu ūdenī un pārklāšanu ar vāku. Pēc tam jūs ar pilinātāju uzklājat traipu uz priekšmetstikliņa stūra un ļaujiet to ar kapilāru iedarbību novilkt pret paraugu. Lai piesaistītu ūdeni, tas palīdz papīra dvieli ievietot slaida pretējā pusē. Kad traips ir izplatījies pa visu priekšmetstikliņu, paraugs ir gatavs pārbaudei.