Pieci soļi, lai sagatavotu Agara šķībi

Agars ir želejveida viela, kas iegūta no sarkano aļģu attīrītajām šūnu sienām. To pievieno mikrobioloģiskajiem barotnēm, kas ir materiāli, uz kuriem laboratorijās audzē mikroorganismus, lai vielai nodrošinātu vairāk cietu struktūru. Agaram nav uzturvērtības, tāpēc, kad zinātnieki to izmanto mikroorganismu kultivēšanai, viņi pievieno dažādas barības vielas, lai palielinātu baktēriju augšanu Petri trauciņos vai mēģenēs. Kad pētnieki uzglabā baktērijas mēģenē, to sauc par agara slīpumu, jo šķidruma augšanas vide sacietē, kamēr mēģene atrodas slīpā stāvoklī. Slīpā uzgriežņa vāciņa augšdaļa neļauj agaram izžūt.

Barotne tiek sagatavota atšķirīgi slīpumiem nekā Petri ēdieniem. Sterilizāciju veic ar agaru mēģenēs; Petri traukus iepriekš sterilizē, pirms tajos ielej sterilizēto agaru. Izmēra nepieciešamo ūdens daudzumu un ielieciet to Erlenmeijera kolbā. Sildiet to uz plīts, līdz tā gandrīz vārās. Ja nepieciešams, pievienojiet citas sastāvdaļas un lēnām un pastāvīgi maisiet maisījumu, līdz tās izšķīst. Šīs sastāvdaļas var ietvert liellopa ekstraktu, peptonu un pH buferus atkarībā no kultivējamo mikroorganismu veida.

instagram story viewer

Pirms dehidrētā agara pulvera pievienošanas sajauciet to ar nelielu daudzumu auksta destilēta ūdens, lai novērstu grumbu veidošanos. Esiet piesardzīgs, pievienojot agaru karstajam šķidrumam, jo ​​tas var putot un pārpildīt trauku. Pievienojiet vienlaikus nelielu daudzumu agara un samaisiet, lai agars vienmērīgi sadalītos. Kad maisījums sāk tvaicēt, izslēdziet siltumu, pirms tas vārās.

Novietojiet nepārsegtās mēģenes uz mēģenes plaukta. Piepildiet mēģenes, ar sterilu pipeti pārnesot no katla apmēram 5 mililitrus - apmēram 0,17 unces vai 1 tējkaroti - izkausētā agara. Katru mēģeni brīvi aizveriet, jo agars netiks sterilizēts, ja tie būs cieši noslēgti. Sterilizējiet visas caurules autoklāvā apmēram 25 minūtes 121 grādā pēc Celsija vai 250 grādos pēc Fārenheita.

Kad agars joprojām ir karsts, uzmanīgi nolieciet plauktu, turot mēģenes uz cietas virsmas vai a bieza grāmata, pārliecinoties, ka barotņu iekšpusē esošā vide ir slīpi attiecībā pret testu caurules. Ļauj barotnei atdzist un sacietēt šajā leņķī, kas palielina agara virsmas laukumu. Pēc agara atdzesēšanas pievelciet mēģenīšu vāciņus. Slīpumi ir gatavi lietošanai, tiklīdz agars ir sacietējis. Tos var uzglabāt istabas temperatūrā vai ledusskapī turpmākai izmantošanai.

Inokulē slīpumu, pārnesot šūnas ar inokulējošo cilpu no vienas kolonijas mikroorganisma uz plāksnes uz slīpuma virsmas. Pārvietojiet cilpu pa slīpa virsmu un atkārtojiet mēģenes. Inkubējiet slīpumu, līdz ir augšanas pazīmes, un tad ielieciet mēģeni ledusskapī.

Teachs.ru
  • Dalīties
instagram viewer