Zinātnieki un pētnieki pēta baktēriju augšanu, laboratorijā sagatavojot kultūras. Petri trauciņos, kas satur barības vielu agaru, baktēriju kultūras tiek audzētas no viena slaucīšanas vai inokulācijas. Studenti var sagatavot barības vielu agaru mājās, izmantojot pārtikas preču vai veselības pārtikas veikalu piederumus zinātnes izstādes projektam. Parastās virtuves ierīces un pamata virtuves piederumi nodrošina instrumentus, lai sagatavotu sterilu barotni, ko var izsniegt Petri traukos. Sekojot sterilām metodēm, sildot materiālus un uzturot virsmas tīras un sausas, rezultāti tiks uzlaboti, novēršot pelējuma un daļiņu piesārņošanu ar kultūru.
Ielieciet kafijas filtru sietā un pakārt sietiņu caurspīdīgās bļodas atverē.
Lēnām ielejiet buljonu filtrā, pārliecinoties, ka buljons nepārplūst no filtra sāniem. Ja filtrs ir aizsērējis daļiņas, noņemiet izmantoto filtru, nomainiet to ar tīru filtru un turpiniet buljona liešanu.
Noņemiet sietiņu un filtru no bļodas augšdaļas un novērojiet, vai buljons šķiet dzidrs (t.i., šķidrumā nav suspendētu daļiņu). Ja šķidrumā peld daļiņas, atkārtojiet 1. un 2. darbību, izmantojot otru dzidru trauku un svaigas kafijas filtru.
Novietojiet katlu uz plīts un ielejiet caurspīdīgo buljonu katlā.
Pievienojiet 16 unces destilēta ūdens katliņam ar buljonu.
Ieslēdziet plīti un noregulējiet karstumu vidēji zemam. Uzkarsē buljonu līdz vārīšanās temperatūrai (t.i., blakus katla malai parādās mazi burbuļi).
Vārajā buljonā (apmēram 2,5 grami) pievieno 1 tējkaroti agara-agara pulvera un maisījumu maisa, līdz pulveris izšķīst. Noteikti samaisiet pulveri, lai tas izšķīdinātu un novērstu želatīna nogrimšanu katla apakšā (kur tas var sadedzināt).
Atkārtojiet 7. darbību, līdz viss agara-agara pulveris ir izšķīdis buljonā.
Turpiniet maisīt buljonu apmēram 1 minūti, lai pārliecinātos, ka viss pulveris ir pilnībā izšķīdis.
Izslēdziet plīti, uzlieciet katla vāku un ļaujiet šķidrumam atdzist vismaz 15 minūtes.
Kārtojiet sterilos Petri trauciņus pēc kārtas, lai tos varētu viegli montēt, taču nenoņemiet vākus. Ja vēlaties, novietojiet triveri, lai turētu siltu podu. Ja Petri trauku vietā izmantojat pārsegus no olu krēma, sterilizējiet olu krēmu, ievietojot tases un vākus. apgrieztu (otrādi) uz folijas pārklātas cepumu lapas un cep cepeškrāsnī vismaz vienu stundu 375 grādu temperatūrā Fārenheits. Pirms lietošanas pārliecinieties, ka sterilizētie kausi un vāki ir pilnībā atdzesēti.
Uzmanīgi pieskarieties katla ārpusei, lai pārbaudītu, vai tas ir silts, un novietojiet podu uz trivera. Ja katls ir pārāk karsts, lai to varētu pieskarties, pagaidiet vismaz 10 minūtes, lai katls atdzistu.
Noņemiet vāku un novietojiet malā. Ielieciet kausu katlā.
Noņemiet vāku no viena Petri trauka un izdaliet barības vielu buljonu, lai trauku piepildītu līdz pusei. Trauku nekavējoties pārklāj ar vāciņu.
Atkārtojiet 14. darbību katram no Petri trauciņiem.
Ļaujiet uzturvielu buljonam netraucēti sacietēt Petri trauciņos vismaz 1 stundu.
Viegli sakratiet Petri trauciņus viens pret otru, lai pārbaudītu, vai barības vielu buljons ir pilnībā sacietējis. Ja buljons nav pilnībā želēts, pagaidiet vēl 20 minūtes, pirms vēlreiz pārbaudāt.
Pārklājiet galdu vai līdzenu virsmu ar papīra dvieļu ruļļu, lai izveidotu sterilu darba zonu. Nojauciet papīra dvieļa lapu un salieciet to četras reizes, lai izveidotu biezu, taisnstūrveida vati. Uzstādiet šo vati vienā darba zonas galā.
Pārnesiet vienu Petri trauku uz sterilo darba zonu un noņemiet vāku. Uzmanīgi pagrieziet trauku un ielieciet vienu galu salocītā vates pusē tā, lai tas gulētu apgriezts un nedaudz leņķains (ar nelielu atstarpi pie papīra dvieļu vates).
Pagrieziet vāku un novietojiet to virs Petri trauka uz sterilās darba virsmas. Ja uz vāka parādās ūdens pilieni, uzmanīgi nokratiet šo mitrumu, pirms to novietojat uz pārklātās virsmas, bet nepieskarieties vāka iekšpusei.
Atkārtojiet 19. un 20. darbību katram Petri trauciņam, novietojot apgrieztā trauka vienu pusi uz iepriekšējā trauka, nevis papīra dvieļu vates. Trauki parādīsies kā sadalīts komplekts ar atstarpēm vienā pusē, lai varētu iztvaikot liekais mitrums.
Apskatiet apgrieztos petri trauciņus, lai pārbaudītu, vai mitrums plāksņu sānos nav iztvaikojis. Kad viss mitrums ir iztīrījies, pagrieziet plāksnes labajā pusē uz augšu un nekavējoties pārklājiet ar vākiem lietošanai.
Inokulē barības vielu agaru uz plāksnes, pirms pārklāj ar vāku, uz uztura agara virsmas noslaukot tamponu ar vēlamo kultūru. Pagrieziet Petri trauciņu tā, lai cietā viela būtu virsū. Inokulēto Petri trauku uzglabā ar cieto vielu virspusē kultivēšanai un vāku apakšā, lai notvertu mitrumu, vaļīgas daļiņas vai izaugumus.
Jums nepieciešamās lietas
- Kafijas filtri
- Sietiņš
- 2 lielas, skaidras bļodas
- 16 oz. beztauku liellopa buljons
- 16 oz. destilēts ūdens
- Virtuves katls ar vāku
- Krāsns
- 10 grami agara agara
- Mērkarote
- Maisītājs
- Papīra dvieļu rullis
- Katlu turētāji
- Metāla kauss
- Sterili petri trauki vai caurspīdīgas olu krēma krūzītes ar vākiem
- Pēc izvēles: taimeris, trivet, krāsns, panna, alumīnija folija, panna
Padomi
Ja uz vākiem parādās pārmērīgs mitrums, nosusiniet un sterilizējiet vākus krāsnī, kura temperatūra ir 375 grādi pēc Fārenheita. vismaz 1 stunda (pirms ievietošanas vākos pārliecinieties, ka vāki ir ievietoti tīrā pannā, kas izklāta ar alumīnija foliju krāsns).
Brīdinājumi
-
Rīkojieties ar karsto trauku, lai izvairītos no apdegumiem. Ja katla puse ir pārāk karsta, šķidrums katlā ir ļoti karsts. Barības vielu buljonam jābūt siltam, lai tas varētu izdalīties traukos, bet ne pārāk karsts, lai atdzesēšanas un sacietēšanas laikā radītu pārmērīgu kondensātu Petri traukos.
Neaiztieciet petri trauka iekšpusi (t.i., plāksni vai vāku), lai kultūrā neievestu nevēlamas baktērijas.
