Western blot tests, ko dēvē arī par imūnblotēšanu, ir īpaša proteīna tests olbaltumvielu maisījumā. Western blot tests tiek veikts pēc gēla elektroforēzes vai ar enzīmiem saistītā imūnsorbenta testa (ELISA) testa, un tajā tiek izmantotas antivielas, lai identificētu specifiskas olbaltumvielas.
Nātrija dodecilsulfāta poliakrilamīda gēla elektroforēze (SDS-PAGE) ir kopīgs tests, ko izmanto, lai atdalītu olbaltumvielas, ko izmanto Western blot. Olbaltumvielas tiek sadalītas pēc svara un elektriskajām īpašībām, pārvietojoties pa gēla matricu.
ELISA testā testa virsmas izveidošanai izmanto fermentus vai antivielas, kas piestiprinātas pie cietas virsmas. Pēc tam testa virsmai pievieno paraugu. Antivielas vai fermenti, kas reaģē vai pievienojas olbaltumvielām, norāda uz pozitīvu rezultātu.
Western blot tests tiek veikts pēc gēla elektroforēzes. Atdalītos proteīnus pārnes (vai notīra) uz nitrocelulozes vai neilona membrānām un identificē ar specifiskām antivielām, kuras iezīmē sekundārs proteīns.
Western blot testu izmanto, lai apstiprinātu pozitīvus rezultātus gēla elektroforēzes vai ELISA testos. Western blot tests var precīzāk identificēt olbaltumvielas un izslēgt viltus pozitīvus rezultātus.