Tāpat kā sekojot garšīgu ēdienu pagatavošanas receptēm, veiksmīgai eksperimentu veikšanai ir jāpievērš uzmanība ķīmisko vielu sajaukšanai pareizajos veidos. Lai atkārtotu eksperimentu un iegūtu tādus pašus rezultātus, ir svarīgi veikt noteiktus procentus, piemēram, 1%, risinājumus.
Kas ir BSA?
Vārds govine nozīmē “govs”, un govju seruma albumīns (BSA) ir olbaltumviela, kas nāk no govīm. Jo īpaši BSA ir olbaltumvielu veids, ko sauc par albumīnu, kas lielā daudzumā atrodams govju asinīs. Asinis ir sarkano asins šūnu maisījums, tāpēc asinis izskatās sarkanas un daudz dažādu olbaltumvielu veidu, kas izšķīdināti ūdenī. Ja šūnas asinīs tiktu noņemtas, jūs paliktu ar dzidru šķidrumu, ko sauc par serumu. Tādējādi BSA ir albumīna proteīns, kas atrodas govju asinīs. Asinīs albumīna uzdevums ir pārnest citus proteīnus no vienas vietas uz otru.
Kas ir 1% šķīdums?
Vārds “šķīdums” raksturo kaut ko tādu, kas pastāv kā šķidrums. Piemēram, gan ūdens, gan piens ir šķīdumi. Kad mēs sakām, ka ūdens šķīdums ir 1% cukura, tas nozīmē, ka 1% molekulu šajā šķīdumā ir cukura molekulas, bet pārējie 99% ir ūdens molekulas. Tādējādi 1% BSA šķīdums nozīmē, ka 1% no molekulām šajā šķīdumā ir BSA. Tā kā BSA bieži pārdod kā sausu pulveri, noteikts tā daudzums ir jāizsver un pēc tam jāizšķīdina šķidrumā, piemēram, ūdenī. BSA pulvera izšķīdināšanu šķidrumā sauc par svara atšķaidījumu, kas bieži rakstīts kā “w / v” instrukcijās, kas pievienotas ķīmiskām vielām vai zinātniskiem eksperimentiem.
Precīzi nosverot nelielu pulvera daudzumu
BSA pulveris ir ļoti viegls un to bieži lieto mazos daudzumos, tāpēc pētniekiem ir nepieciešama ļoti jutīga svēršanas skala, lai precīzi izmērītu BSA. Pētniekiem bieži nav vajadzīgs liels daudzums BSA šķīduma, tāpēc vairāku galonu vai litru izgatavošana vienlaikus būtu pulvera un uzglabāšanas vietas izšķiešana. Bioķīmijas un molekulārās bioloģijas eksperimentos bieži izmanto nelielu daudzumu BSA šķīduma, un parasti ir laba prakse to katru reizi padarīt svaigu. Vienkāršs 1% BSA šķīduma pagatavošanas veids ir nosvērt vienu gramu BSA pulvera, ielej to graduētā cilindrā kas var saturēt vairāk nekā 100 mililitrus (ml) ūdens, un pēc tam pievieno ūdeni, līdz šķidruma līmenis sasniedz 100 ml atzīme. Matemātiski viens dalīts ar 100 ir 1%.
Pareizā šķīdinātāja izvēle BSA pulvera izšķīdināšanai
Ne visos eksperimentos BSA jāizšķīdina ūdenī, jo tīram ūdenim ir atšķirīgas īpašības nekā šķidrumam, kas plūst dzīvnieku asinsritē un kas ieskauj šūnu ārpusi. Dzīvnieku iekšpusē esošajā šķidrumā ir noteikts daudzums sāļu un skābju, tādēļ, ja BSA šķīduma mērķis ir pārvadājot zāles, kas tiks injicētas dzīviem dzīvniekiem, BSA pulveris jāizšķīdina īpašā šķidrums. Izplatīts šķidrums, ko izmanto eksperimentiem, ir fosfāta buferšķīdums (PBS). PBS piemīt līdzīgas īpašības kā šķidrumam, kas atrodas dzīvos organismos, piemēram, pelēm, suņiem un cilvēkiem, tāpēc to var izmantot BSA izšķīdināšanai un jebkurai ķīmiskajai vielai, kas BSA pārvietojas apkārt.