HPLC piedāvā ātru, automatizētu un ļoti precīzu metodi noteiktu parauga ķīmisko komponentu identificēšanai, taču tā var būt dārga, sarežģīta un neder visiem paraugiem. Medicīnas, tiesu medicīnas, vides un ražošanas laboratorijās tiek izmantota metode, lai kvantitatīvi noteiktu un atdalītu ķīmiskās vielas paraugā. HPLC ir gan priekšrocības, gan trūkumi, salīdzinot ar citām metodēm.
HPLC un līdzīgas metodes
Tāpat kā citas hromatogrāfijas formas, arī HPLC ļauj atdalīt ķīmiskās sastāvdaļas, izmantojot kustīgu fāzi un stacionāru fāzi. Kustīgā fāze ir šķidra, un stacionārā fāze ir cieta. Tā kā dažādās sastāvdaļas pārvietojas ar dažādu ātrumu, tās atdala viena no otras. Alternatīvās metodes ietver kapilāru elektroforēzi, kur vielas migrē caur šķīdumiem elektriskā veidā lauka un citas hromatogrāfijas metodes, piemēram, cietās fāzes ekstrakcija, gāzu hromatogrāfija un plānslānis hromatogrāfija.
Ātrums, efektivitāte un precizitāte
HPLC ir ārkārtīgi ātrs un efektīvs salīdzinājumā ar citām hromatogrāfijas metodēm, piemēram, TLC. Tas izmanto sūkni, nevis gravitāciju, lai šķidru šķīdinātāju piespiestu cauri cietam adsorbējošam materiālam, pārvietojoties ar dažādu ātrumu, izdalās dažādi ķīmiskie komponenti. Procesu var pabeigt aptuveni 10 līdz 30 minūtēs, un tas nodrošina augstu izšķirtspēju. Tas ir precīzs un ļoti reproducējams. Tā kā tas lielā mērā ir automatizēts, pamata HPLC skrējienus var veikt ar minimālu apmācību.
Izmaksas un sarežģītība
Neskatoties uz tā priekšrocībām, HPLC var būt dārgs, jo tam nepieciešams liels daudzums dārgu organisko vielu. Tādi paņēmieni kā cietās fāzes ekstrakcija un kapilārā elektroforēze var būt lētāki un pat ātrāki, īpaši analizēšanai saskaņā ar labu ražošanas praksi. Lai gan esošo HPLC metožu izmantošana ir samērā vienkārša, problēmu novēršana vai jaunu metožu izstrāde var būt sarežģīta. Tas lielā mērā ir saistīts ar dažādu moduļu, kolonnu un mobilo fāžu masīvu.
Jutīgums un izšķirtspēja
Kopumā HPLC ir daudzpusīgs un ārkārtīgi precīzs, ja nepieciešams identificēt un kvantitatīvi noteikt ķīmiskās sastāvdaļas. Ar daudzām darbībām HPLC precizitāte lielā mērā ir atkarīga no procesa automatizācijas un tāpēc ļoti reproducējamas. HPLC ir zema jutība pret noteiktiem savienojumiem, un dažus no tiem nevar noteikt, jo tie ir neatgriezeniski adsorbēti. Gaistošās vielas labāk atdala ar gāzu hromatogrāfiju.