Mokslininkams ir technikams dažnai reikia apskaičiuoti ląstelių koncentraciją suspensijoje. Pavyzdžiui, pacientui paėmus kraują iš gydytojo kabineto, laboratorija gali naudoti tam tikrus metodus, kad surastų baltųjų kraujo kūnelių kiekį tam tikrame kraujo tūryje. Tai suteikia gydytojui daug informacijos apie jos paciento sveikatą, ypač apie jo imuninę sistemą ir tai, ar jis kovoja su infekcija, ar su kita liga. Tokiais bandymais gali būti ieškoma daugybė kitų kraujo ląstelių, taip pat stuburo skysčių ir kitų kūno skysčių, tokių kaip spermos ląstelių skaičius spermoje vaisingumo tikslais. Mokslininkai taip pat apskaičiuoja bakterijų, mielių ir kitų mikroorganizmų ląstelių koncentraciją įvairiais tikslais, pradedant ekologiniais tyrimais ir baigiant pramoninėmis technologijomis. Viena iš labiausiai paplitusių metodų taip pat mokoma daugelyje kolegijos biologijos pamokų, ir jai naudojamas prietaisas, vadinamas skaičiavimo kamera.
Kad ląstelių suspensija galėtų patekti į skaičiavimo kamerą, ją gali tekti praskiesti, nes joje gali būti tūkstančiai ar milijonai ląstelių. Tokiu atveju negalima pagrįstai suskaičiuoti ląstelių. Mėginiui praskiesti naudokite sterilią pipetę ir įdėkite dešimt mikrolitrų ląstelių tirpalo į mėgintuvėlį, kuriame yra 90 mikrolitrų skiediklio. Skiediklio tipas priklausys nuo ląstelės tipo. Gerai išmaišykite. Šis tirpalas dabar yra dešimt kartų praskiestas labiau nei pradinis mėginys, todėl jo praskiedimo koeficientas yra 10
-1. Pažymėkite. Pakartokite tai kelis kartus, kiekvieną kartą naudodami sterilią pipetę, kol tirpalas bus pakankamai praskiestas. Jei praskiedėte jį antrą kartą, antrasis mėgintuvėlis buvo 100 kartų praskiestas daugiau nei pradinis tirpalas, taigi praskiedimo koeficientas buvo 10-2 ir taip toliau.Norėdami nustatyti teisingą skaičiavimo kameros praskiedimo koeficientą, gali tekti išbandyti kelis skiedimus. Skaičiavimo kamera iš esmės yra labai maža, aiški, stačiakampė dėžutė, kurios viršuje užrašytas tikslus gylis ir tikslus tinklelis. Jis taip pat žinomas kaip hemocitometras arba kartais hemacitometras. Siekiama, kad suspensija būtų pakankamai praskiesta, kad, žiūrint į skaičiavimo kamerą, ląstelės nepersidengtų ir jos vienodai pasiskirstytų tinklelyje. Praskiestą suspensiją su ląstelėmis pipete supilkite į skaičiavimo kameros duobutę, kur kapiliariniu būdu ji nusės į tinklelio kamerą. Padėkite skaičiavimo kamerą ant mikroskopo pakopos ir žiūrėkite į ją esant mažai galiai.
Tinklelyje yra kvadratų, sudarytų iš dar mažesnių kvadratų. Pasirinkite maždaug keturis ar penkis kvadratus arba kiek jums reikia suskaičiuoti mažiausiai 100 langelių pagal jūsų pasirinktą modelį, pvz., Keturis kampus ir centrinį kvadratą. Jei langeliai yra dideli, tai gali būti dideli kvadratai, tačiau jei langeliai yra maži, galite pasirinkti mažesnius kvadratus.
Konkretus kiekvieno tinklelio kvadrato tūris gali skirtis priklausomai nuo skaičiavimo kameros gamintojo, tačiau dažnai kameros gylis yra 0,1 milimetrų, didelių kvadratų plotas yra 1 kvadratinis milimetras, o mažesnių kvadratų plotas yra 0,04 kvadrato milimetrais. Didesnių kvadratų tūris yra 0,1 kubinio milimetro. Šiame pavyzdyje tarkime, kad iš viso suskaičiavote 103 ląsteles į penkis kvadratus ir kad pradinį mėginį skiedėte tol, kol praskiedimo koeficientas buvo 10-2.
Jei kiekvieno tinklelio kvadrato tūris yra 0,1 kubinio milimetro ir buvo suskaičiuoti penki, tada bendras suskaičiuoto kameros tūris buvo 0,5 kubinio milimetro ir buvo 103 langeliai. Padvigubinus, kad būtų 1 kubinis milimetras, būtų 206 ląstelės. Vienas kubinis centimetras prilygsta 1 mililitrui, o tai yra naudingas skysčių matavimas. Kubikiniame centimetre yra 1 000 kubinių milimetrų. Todėl, jei suspensija būtų buvusi kubiniame centimetre arba mililitre, būtumėte suskaičiavę 206 000 (206 x 1 000) ląstelių. Tai atrodo kaip lygtis:
Tinklelio kvadrato tūris × suskaičiuotų kvadratų skaičius = bendras suskaičiuotos suspensijos tūris
Ląstelių skaičius ÷ suskaičiuotos suspensijos tūris = ląstelių skaičius kubiniuose milimetruose
Ląstelių skaičius milimetrais kubo × 1000 = ląstelių skaičius mililitre
Turėsite apskaityti bet kokį praskiedimą, kad pradinis tirpalas būtų įskaitytinas mikroskopu. Šiame pavyzdyje praskiedimo koeficientas yra 10-2. Norėdami apskaičiuoti pradinę tirpalo koncentraciją:
Ląstelių skaičius mililitre ÷ skiedimo faktorius = ląstelių koncentracija
Šiame pavyzdyje ląstelių skaičius mililitre yra 206 000, padalijant iš 10-2 (0,01) gaunama 20 600 000 ląstelių koncentracija mililitre pradinio mėginio.