Pagrindinė priežastis, kodėl nudažote egzempliorių prieš padėdami jį į mikroskopą, yra geriau jį apžiūrėti, tačiau dažymas daro ne tik ląstelių kontūrų išryškinimą. Kai kurios dėmės gali prasiskverbti pro ląstelių sieneles ir išryškinti ląstelių komponentus, ir tai gali padėti mokslininkams vizualizuoti medžiagų apykaitos procesus. Dėmės taip pat padeda atskirti gyvas ląsteles nuo negyvų. Be to, dažymas leidžia mokslininkams suskaičiuoti tam tikros rūšies ląstelių skaičių tam tikroje biomasėje. Yra dvidešimt ar daugiau skirtingų rūšių dėmių, ir kiekviena iš jų turi savo paskirtį.
TL; DR (per ilgai; Neskaiciau)
Pagrindinis dažymo tikslas yra paryškinti ląsteles ir ląstelių dalis. Yra daugiau nei 20 skirtingų dėmių rūšių, o dėmių tipas priklauso nuo to, ko ieškote.
Dėmių rūšys
Dėmės pasirinkimas priklauso nuo to, ko ieškote. Ne visos dėmės yra tinkamos gyvoms ląstelėms, tačiau tos, kurios yra Bismarck rudos, tolueno raudonos, Nilo mėlynos ir Nilo raudonos, ir tam tikros fluorescencinės medžiagos, naudojamos DNR paryškinti. Kai kurios dėmės paryškina sporas, kai kurios aptinka lipidus ir baltymus, o kai kurios pakeičia spalvą esant krakmolui. Tyrimo tikslas nustato geriausią dėmių tipą. Pavyzdžiui, gydytojas, atlikdamas PAP tepinėlį, naudos Eosin Y. Tai rūgštiniai fluorescenciniai dažai, kurie, raudonai kontaktuodami su raudonaisiais kraujo kūneliais, citoplazma ir ląstelių membranomis, tampa raudoni. Jis taip pat naudojamas kraujo čiulpams tirti.
Kai kuriais atvejais tyrėjas gali naudoti daugiau nei vieną dėmę. Pavyzdžiui, hematoksilinas yra dėmė, kuri ląstelių branduolius paverčia mėlynais. Naudojant kartu su eozinu, kuris kitas ląstelės dalis paverčia raudona ar rausva, jis suteikia stipresnį kontrastą ir padeda lengviau atskirti branduolius. PAP tepinėlius ir kraujo čiulpų mėginius lengviau ištirti, kai šios dvi dėmės naudojamos kartu.
Gramo dėmė: Ligoninės darbuotojai naudoja Gramo dėmę kenksmingoms bakterijoms nustatyti. Tai iš tikrųjų yra dažiklių serija, turinti skirtingą poveikį skirtingų tipų bakterijoms ir suteikianti gydytojams svarbią diagnostikos priemonę. Gramo dėmė yra trijų dalių procesas. Pirmojoje pridedama Huckerio krištolo violetinė, kuri visas bakterijas nudažo vienoda violetine spalva. Kitame etape pridedama jodo dėmė, dėl kurios spalva prilimpa prie gramteigiamų ląstelių, kurios pirmiausia yra Staphylococcus ir Streptococcus. Dėmė nuplaunama, paliekant gramteigiamas ląsteles su ryškia violetine spalva; tada įterpiamas trečiasis dėmelis - Safraninas O, siekiant sustiprinti kontrastą tarp gramneigiamų bakterijų ir likusios skaidrių medžiagos.
Dažymo procedūra
Ruošdami egzempliorių ant skaidrės, galite jį tvirtinti sausai arba drėgnai, galite supjaustyti į ploną dalį arba sutepti. Naudojant dėmę, įprasta procedūra yra mėginio pritvirtinimas šlapiu būdu, tai reiškia, kad ant stiklelio uždėkite vandens lašą, įdėkite mėginį į vandenį ir uždenkite dangčiu. Tada lašintuvu dėkite dėmę ant skaidrių kampo ir leiskite ją kapiliariniu būdu pritraukti bandinio link. Tai padeda įdėti popierinį rankšluostį į priešingą stiklelio pusę, kad pritrauktų vandenį. Kai dėmė pasklis po visą stiklelį, bandinys bus paruoštas tyrimui.