Nors jų negalima pamatyti plika akimi, bakterijų yra visur. Jie egzistuoja maiste, dirvožemyje, vandenyje, paviršiuose mūsų namuose, kūnuose ir ant jų. Bakterijos paprastai būna mišriose populiacijose. Tam tikros bakterijos išskyrimas iš kitų bakterijų rūšių tam tikrame mėginyje leidžia mikrobiologams ištirti jos struktūrą ir funkciją, savybes, naudojamas identifikuojant. Mikrobiologai dažnai išskiria bakterijas naudodami vieną iš kelių juostelių plokščių metodų.
Įrankiai
Mikroorganizmams pernešti naudojama skiepijimo kilpa. Jis susideda iš nichromo arba platinos vielos, kurios viename gale yra maža, apvali kilpa. Kitas galas yra tiesus ir stumiamas į rankeną. Taip pat yra plastikinių vienkartinių skiepijimo kilpų. Bakterijas galima išskirti tik tada, kai jos auga. Mikrobiologai augina bakterijas, kad būtų galima izoliuoti plokšteles sekliuose, apvaliuose Petri lėkštelėse, užpildytose kieta terpe, vadinama agaru. Agaras imituoja aplinką, kurioje natūraliai auga bakterijos. Terpės užpildyti indai yra sterilūs ir uždengti dangčiais, kad būtų išvengta nepageidaujamų organizmų augimo. Izoliuojant plokštelių plokštelę, skiepijimo kilpa pakartotinai sterilizuojama Bunseno degiklio liepsnoje.
Principas
Juostinių plokščių technika yra populiariausias būdas išskirti specifines bakterijas iš mėginio, kuriame yra mikroorganizmų mišinys. Metodika iš esmės atskiedžia organizmų skaičių ir sumažina jų tankį. Tai leidžia mikrobiologams atskirti ir izoliuoti atskiras bakterijų kolonijas. Kolonija yra matomas bakterijų klasteris. Visos vienos kolonijos bakterijos yra kilusios iš tos pačios bakterijų ląstelės. Vadinasi, atskiros kolonijos yra „grynos“ kolonijos. Gryna kolonija perkeliama į kitą plokštelę, kad gautų gryną kultūrą, susidedančią iš vieno tipo bakterijų.
Procedūra
Tinkamai atlikus izoliacijos juostelių izoliavimą, mėginys išretinamas ir atskiros bakterijų ląstelės gali išsivystyti į izoliuotas kolonijas. Mikrobiologas pirmiausia sterilizuoja inokuliuojančią kilpą liepsnoje. Ji atvėsina kilpą, paliesdama ją prie agaro, paskui panardina kilpą į mėginį ir paskleidžia ją pirmyn ir atgal, kad padengtų plokštelės dalį. Ji sterilizuoja kilpą, ją atvėsina ir vilkdama pasėja antrą gretimą plokštelės dalį kilpą per pirmąją dalį kelis kartus ir uždengiant antrąją dalį naudojant zigzagą judesio. Tai paima nedidelį bakterijų skaičių iš pirmojo skyriaus ir perkelia juos į antrąjį skyrių. Kiek kartų ši pagrindinė procedūra kartojama, priklauso nuo naudojamo brūkšninių plokščių metodo. Nepaisant metodo, pirminis mėginys naudojamas tik pirmajai plokštelės daliai inokuliuoti.
Streak Plate metodas
Juostinių plokščių metodai skiriasi nuo dryžuotų agaro pjūvių skaičiaus. T-dryžių metodui naudojamos trys sekcijos: viršutinė pusė ir dvi vienodo dydžio apatinės sekcijos. Pradinis inokuliatas dedamas į viršutinę plokštelės pusę. Bakterijos tempiamos iš viršutinės dalies į vieną iš apatinių dalių, tada iš tos apatinės sekcijos į kitą. Taikant kvadrantinį metodą, dryžuotos keturios vienodo dydžio atkarpos. Nepertraukiamo dryžavimo metodas paprastai inokuliuoja viršutinę plokštelės pusę, pasukant ją 180 laipsnių kampu, ir inokuliuoti kitą plokštelės pusę, nesterilizuojant kilpos ir netempiant bakterijų iš ankstesnių skyrius.