겔 전기 영동은 DNA 가닥을 측정하고 분류하기 위해 실험실에서 사용되는 방법입니다. 정상적인 조건에서 DNA는 대부분의 현미경으로 볼 때에도 조작하기에는 너무 작기 때문에 필요합니다. 겔 전기 영동 실험실은 비교적 간단한 절차를 사용하며 동일한 기본 기술을 사용하여 개별 단백질을 분리 할 수도 있습니다.
젤 매트릭스
겔 전기 영동 절차를 시작하려면 먼저 겔을 만들어야합니다. 일반적으로 젤은 아가 로스라는 물질을 사용하여 얇은 시트로 만들어집니다. 가루 아가 로즈를 플라스크에 넣은 다음 버퍼라고하는 소금물 용액을 넣습니다. 이 아가 로스와 완충액의 혼합물은 두 물질이 함께 녹을 때까지 가열 한 다음 성형 금형에 부어 넣습니다. 그런 다음 젤이 식기 전에 빗이라는 장치를 몰드의 한쪽 끝에 놓습니다. 젤이 냉각되면 빗이 제거되어 DNA 샘플을 보관하는 데 사용할 작은 슬롯이 남습니다.
냉각 된 아가 로스 혼합물 (젤 매트릭스라고 함)의 특별한 특징은 소금물로 생성된다는 사실에서 비롯됩니다. 전기가 통하면 매트릭스가 전도성이되어 길이를 따라 전기가 흐르게됩니다. 겔 매트릭스의 또 다른 특별한 특성은 규칙적이고 미세한 구멍이 있다는 것입니다. 이 구멍은 DNA 가닥이 겔 매트릭스를 통해 이동하고 분류 과정을 용이하게합니다.
전기 영동 챔버
다음 단계는 전기 영동 챔버를 만드는 것입니다. 이것은 양쪽 끝에 양극 및 음극 전기 연결이있는 작은 직사각형 상자입니다. 챔버는 일반적으로 얕고 탁상에 들어갈 수있을만큼 작으며 Plexiglas와 같은 투명한 재료로 제작되었습니다.
소금물 용액을 전기 영동 챔버의 바닥에 붓고 겔 매트릭스를이 용액에 약간 담근다. 소금물은 전기의 흐름을 돕고 겔 매트릭스를 촉촉하게 유지하는 두 가지 용도로 사용됩니다. DNA는 음전하에 의해 추진되므로 샘플이 음전하 연결 옆에 위치하도록 매트릭스를 배치하십시오.
DNA 준비
그런 다음 DNA 샘플을 준비합니다. 용액의 DNA는 거의 볼 수 없기 때문에 로딩 버퍼라고하는 착색제를 각 샘플에 추가합니다. 이 약제는 또한 DNA 용액을 두껍게하여 콧물이 적고 작동 가능하게 만듭니다. 파이 펫을 사용하여 DNA 용액 샘플을 젤 매트릭스의 각 교대로 이동하는 슬롯으로 옮깁니다. 각 샘플 사이의 빈 슬롯에 실험 제어 및 비교를 위해 길이를 이미 알고있는 DNA 용액 (DNA 표준이라고 함)을 놓습니다.
전원 켜기
이제 전기 영동 챔버를 켜십시오. 음의 힘 하에서 DNA 샘플은 챔버의 길이에 걸쳐 강제됩니다. 작은 DNA 가닥은 겔 매트릭스를 통해 더 빠르게 이동하고 짧은 시간 내에 더 길고 느린 가닥에서 분리됩니다. 착색제의 염료는 DNA의 흔적을 따라갈 수있게합니다. DNA의 개별 가닥은 볼 수 없지만 같은 길이의 가닥은 함께 뭉칠 것입니다.
마지막 단계
DNA가 분류되면 매트릭스가 전기 영동 챔버에서 제거됩니다. 그런 다음 DNA를 염색하여 더 쉽게 측정하고 검사 할 수 있습니다.