과학자들은 유세포 분석을 사용하여 여러 유형의 세포 또는 미세 유기체를 구별합니다. 의료 진단 또는 법의학 병리학과 같은 많은 응용 분야에서 사용되는 도구입니다. 이 실험 기법은 수행하기 매우 쉽지만 생성 된 복잡한 데이터의 분석은 유세포 분석기는 여러 실험 요인 및 / 또는 세포 계측기로 인해 더 어렵습니다. 매개 변수. 따라서 세포 측정 데이터를 CELLQuest 또는 FlowJo와 같은 정교한 전문 프로그램을 사용하여 시각화하고 분석하는 것은 일상적인 일입니다. 이들에 의해 생성 된 결과를 이해하려면 유세포 분석 기술, 기계 및 소프트웨어에 대한 지식이 필요합니다. 실험.
"조사중인 질문이나 가설이 무엇 이었습니까?"라고 질문하여 실험의 목적을 명확히하십시오. 이것은 ~이 될 것이다 통계 세포 측정법을 사용하여 추가 분석을 위해 원시 결과를 적절한 형식 및 설정으로 조정하는 데 필요 소프트웨어. 관련 설정 (예: 양성 세포, 음성 게이트, 형광 강도, 세포 집단 등)으로 데이터를 표시하기 위해 필요한 모든 변경을 수행합니다.
게이트를 찾으십시오. 세포를 그룹화하거나 밀도 플롯 또는 등고선 다이어그램에서 함께 클러스터링하여 관찰 할 수 있습니다. 그룹은 종종 그들의 정체성에 따라 분리됩니다. 한 그룹이 특정 마커 또는 항체에 대해 매우 강하게 염색하면 해당 그룹의 구성원 모두 해당 마커를 표현하는 특정 세포 유형의 정체성을 가지고 있다는 결론을 내립니다. 이러한 마커 중 하나 이상에 대해 양성인 세포를 찾는 것이 일반적이며, 이러한 세포는 일반적으로 중간이며 "이중 양성"으로 표시됩니다.
산포도를보세요. 산점도에서 셀 그룹이 분산되는 방식은 셀 크기를 나타냅니다. 산란이 매우 크거나 높은 세포는 일반적으로 큰 세포입니다. 그러나 그들은 단순히 세포질의 비율이 높기 때문에 클 수도 있고 핵이 매우 커서 높을 수도 있습니다. 조사중인 생물학에 따라 이것은 물론 실험마다 크게 다를 것입니다.
숫자를보세요. Y 축의 카운트를 유지하면서 한 축 (일반적으로 X 축)에 다른 매개 변수를 표시하도록 플롯을 조정합니다. 특정 매개 변수에 대해 양수인 표본 모집단의 비율을 나타냅니다. 피크는 일반적으로 양성으로 염색 된 샘플에서 관찰되며 음성 대조군에는 없습니다. 견본.
다중 매개 변수 히스토그램을 살펴보십시오. X 축과 Y 축을 조정하여 각각 다른 매개 변수를 나타냅니다. 실험 중에 조사한 결과, 속성에 대한 더 깊은 이해를 얻을 수 있습니다. 샘플의. 예를 들어, X 축을 적색 형광으로 설정하고 Y 축을 녹색 형광으로 설정하여 사분면 스타일 게이트를 계산할 수 있습니다. 샘플을 사용하여 세포가 존재하고 적색 또는 녹색 형광, 두 가지 색상 모두에 대해 염색 된 사분면의 네 영역을 보여줍니다. 모두. 이를 통해 이기종 샘플을 구성 요소로 나눌 수 있으며 겹치는 엔티티를 시각화하고 정량화 할 수 있습니다.
참고 문헌
- “유세포 분석 데이터 분석”; Susan Sharrow; 1991
- "유세포 분석: 기기 및 데이터 분석"; Marvin Van Dila; 1985
- "유세포 분석 프로토콜"; Teresa와 Robert Hawley; 2004
저자 정보
Palmer Owyoung은 캘리포니아 대학교 샌디에이고에서 국제 비즈니스 석사 학위를 취득했으며 University of California at Santa Barbara에서 사회학 학사 학위를 받았으며 훈련 된 분자입니다. 생물 학자. 그는 2006 년부터 프리랜서 작가로 활동하고 있습니다. 글을 쓰는 것 외에도 그는 정규 Forex 상인이자 인터넷 마케팅 담당자입니다.
사진 크레딧
폴카 도트 RF / 폴카 도트 / 게티 이미지