과학자들은 DNA를 구성 뉴클레오타이드로 분해하거나 배열 할 수 있습니다. 예를 들어 유전 질환이 있는지 사람에게 알릴 수 있습니다. 일반적인 DNA 추출 방법은 프로세스의 한 단계에서 이소프로판올 또는 에탄올을 사용하는 것입니다. 그러나 세포에는 단백질 및 지질과 같은 다른 많은 분자가 포함되어 있으며 과학자들은 자연스럽게 가능한 한 순수한 DNA 솔루션을 원합니다.
DNA 추출 방법은 일반적으로 여러 단계를 포함합니다. 막 지질을 제거하고 DNA를 단백질, RNA 및 기타로부터 분리해야합니다. 오염 물질. 두 가지 일반적인 프로토콜은 박테리아 플라스미드 DNA 추출 및 페놀-클로로포름 추출을위한 알칼리 용해입니다. 두 방법 모두에서 핵산의 에탄올 또는 이소프로판올 침전은 최종 단계 중 하나입니다. DNA 또는 RNA가 침전되면 (용액에서 떨어짐) 물에 재현 탁 할 수 있습니다.
에탄올은 좋은 용매입니다
에탄올과 이소프로판올은 모두 물과 잘 혼합되지만 (혼 화성) 물보다 유전 상수가 낮습니다. 이는 솔루션에서 양전하와 음전하를 보호하고 분리 된 상태로 유지하는 능력이 가난하다. 예를 들어 물의 유전 상수는 78.5이고 에탄올의 상수는 24.3입니다. DNA는 음전하를 띠기 때문에 칼륨이나 나트륨과 같은 용액의 양이온에 끌립니다. 에탄올은 양전하를 띤 이온과 DNA를 분리하는 능력이 물보다 부족합니다.
에탄올은 DNA 농도를 증가시킵니다
에탄올은 또 다른 이유로 DNA를 덜 용해시킵니다. 에탄올 분자는 물 분자와 수소 결합이라는 상호 작용을 형성 할 수 있으므로 DNA를 수화하는 데 사용할 수있는 물 분자의 수를 줄입니다. 이 효과와 낮은 유전 상수 사이에서 에탄올은 기본적으로 DNA가 용액의 양이온과 응집하여 튜브 바닥에 고체 또는 침전물을 형성합니다. DNA를 침전시키는 것은 용액의 다른 오염 물질이 동시에 침전되지 않기 때문에 DNA를 더 농축시키는 역할을합니다.
프로세스의 추가 요소
에탄올 세척은 또한 염 및 세제와 같은 저 분자량 오염 물질을 제거하는 역할을합니다. 선택한 소금은 이전 단계에서 나트륨 도데 실 설페이트 (SDS) 세제를 침전해야하는지 여부에 따라 달라질 수 있습니다. 예를 들어, 칼륨 도데 실 설페이트는 불용성이며 침전 될 것이므로 알칼리 용해에서 칼륨 아세테이트를 사용하면 에탄올 / 이소프로판올을 첨가하기 전에 SDS를 제거 할 수 있습니다. RNA 침전에는 일반적으로 더 많은 에탄올이 필요하지만 에탄올은 또한 거의 동일한 이유로 RNA를 침전시키는 데 사용할 수 있습니다.