바이러스의 역가를 계산하는 것은 과학자가 특정 샘플에서 바이러스의 수를 세고 있다고 말하는 복잡한 방법입니다. 바이러스 역가를 계산하기 위해 과학자들은 다양한 농도의 바이러스 용액으로 성장하는 박테리아 플레이트를 감염시킵니다. 바이러스로 인해 죽은 박테리아를 세어 원래 솔루션의 바이러스 수를 알아냅니다. 감염.
장갑을 끼고 배양 튜브 10 개에 육수 9ml를 채우고 "10 ^ -1", "10 ^ -2", "10 ^ -3"이라고 표시하고 "10 ^ -10"까지 계속합니다. 이 튜브는 파지를 계산하는 데 사용되는 바이러스 연속 희석에 사용됩니다. 역가. 바이러스는 엄청나게 높은 농도로 자랄 수 있기 때문에 효과적으로 계수하려면 희석해야합니다. 각 튜브는 바이러스의 10 배 희석을 나타냅니다.
“10 ^ -1”라벨이 붙은 튜브에서 혼합 배양액 1ml를 취하여 새 피펫과 함께“10 ^ -2”라벨이 붙은 다음 튜브로 옮깁니다. 이 튜브도 섞는다.
연속 희석 시리즈를 생성하려면이 패턴을 계속하십시오. 9ml의 튜브 9 개와 10ml의 튜브 1 개로 끝납니다. 튜브의 바이러스로드는 10 배 (첫 번째 튜브) 또는 100 배 (두 번째 튜브)에서 100 억배 (최종 튜브)까지 희석됩니다.
한천에 세균 배양액 두 방울을 넣고 부드럽게 섞는다. 이들은 죽을 박테리아이며 특정 용액에서 바이러스 입자의 수를 계산할 수 있습니다.
튜브가 여전히 뜨거운 수조에있는 동안 해당 한천 튜브에 각 연속 희석액 1ml를 추가합니다. 예를 들어, 10 ^ -1 연속 희석액 1ml를 "10 ^ -1"이라고 표시된 한천 튜브에 넣어야합니다.
각 튜브를 혼합 한 다음 각 튜브를 해당 라벨이있는 페트리 플레이트에 붓습니다. 이렇게하면 각 접시에 박테리아와 바이러스가 접종 된 얇은 한천 층이 생성됩니다. 플레이트가 인큐베이터에서 밤새 자랍니다.
인큐베이터에서 접시를 꺼내서 검사하십시오. 플라크라고하는 작고 투명한 반점을 제외하고, 박테리아가 자란 접시 전체에 흐린 부분이 보일 것입니다. 이 플라크는 죽은 박테리아의 패치이며 각 플라크는 하나의 바이러스를 나타냅니다.
접시에있는 플라크의 수에 10을 곱합니다. 157 개의 플라크를 세면 1570을 받게됩니다.
이전 단계에서 얻은 숫자에 희석 튜브에있는 숫자의 역수를 곱하십시오. 예를 들어, 선택한 플레이트가 10 ^ -5 플레이트 인 경우 1570에 10 ^ 5를 곱하여 157000000을 얻습니다. 이 최종 숫자는 파지 역가이며 원래 배양액의 ml 당 바이러스 수를 나타냅니다.