선생님이 박테리아 샘플을 건네 주면서 다음과 같이 질문합니다.이 샘플에는 생존 가능한 미생물이 몇 개 있습니까? 이것은 무엇을 의미하며 어떻게 파악합니까? 한 가지 방법은 식민지 형성 단위(CFU).
CFU는 무엇입니까?
CFU는 배지에서 자라는 미생물의 개별 콜로니 수를 나타냅니다. 이 값은 차례로 플레이트에 콜로니를 형성 할 때 복제 할 수있는 박테리아의 수를 나타냅니다. 샘플링을 포함하는 CFU 공식이 있습니다.
CFU를 어떻게 찾습니까?
액체 샘플에서 박테리아 수를 계산하는 것은 매우 어렵습니다. 너무 많고 너무 작습니다. 더군다나 그들 중 일부는 죽고 다른 일부는 살아있을 수 있으며, 죽은 사람들은 합계에 포함되지 않아야합니다. 당신은 관심이 있습니다 생존 가능한 박테리아, 또는 복제 할 수있는 박테리아. 그렇다면 얼마나 많은 박테리아가 있는지 어떻게 알 수 있습니까?
같은 방식으로 1,000 명을 대상으로 한 설문 조사를 10,000 명에게 적용하여 특정 주제에 대해 어떻게 생각할지 알아낼 수 있습니다. 당신은 원래 샘플의 작은 부분을 시도하고 취할 수 있고, 얼마나 많은 박테리아가 있는지 알아낼 수 있습니다 그 부분을 계산 한 다음 원본에 몇 개가 있었는지 대략적으로 계산합니다. 견본.
희석을 사용하여 CFU 찾기
주어진 샘플의 CFU를 찾는 절차에는 먼저 해당 샘플을 희석해야합니다. 희석액은 올바른 성장 배지가있는 플레이트에 도금됩니다. 원래 샘플이 매우 농축 될 수 있기 때문에 다중 희석은 종종 좋은 생각입니다.
주어진 시간 동안 박테리아가 접시에서 자라도록 한 후, 개별 식민지 접시에 계산됩니다. 샘플이 너무 농축 된 경우 개별 콜로니 대신 박테리아 성장으로 덮인 넓은 영역을 볼 수 있습니다. 잔디. 즉, 개별 콜로니를 볼 수 있도록 샘플을 더 희석하고 다시 성장해야합니다.
개별 콜로니는 여러 번 자신을 복제 한 단일 박테리아에서 유래하므로 이들 만 CFU에 포함됩니다.
CFU를 찾기위한 실험 절차
CFU 계산을 수행하기 위해 희석을 사용하는 예는 다음과 같습니다. 먼저 교사가 제공 한 초기 샘플에서 1mL를 가져와 접시에 넣습니다. 다음날 당신은 박테리아의 잔디밭이 있음을 알 수 있습니다. 이것은 CFU의 수를 계산할 수 없음을 의미합니다. 다음 단계는 약간의 희석을하는 것입니다.
먼저 1 mL의 샘플을 취하여 9 mL의 액체 매체에 희석합니다. 희석액은 샘플 1 부 대 희석제 9 부이므로 1:10 희석이라고합니다. 그런 다음 1:10 희석액 1mL를 액체 매체 9mL에 추가합니다. 이 희석은 1: 100 희석입니다. 마지막으로 1: 100 희석액 1mL를 취하고 액체 매체 9mL를 추가하여 1: 1,000 희석을합니다. 각 희석에 대해 이제 10 mL의 희석 된 세균 배양이 있습니다.
희석이 완료되면 0.5 mL의 희석액을 플레이트에 넣습니다. 희석이 도금 된 플레이트에 라벨을 지정해야합니다.
다음날 돌아와서 모든 판에 개별 식민지가있는 것을 볼 수 있습니다. 당신은 사이에 접시를 선택하고 싶습니다 30 및 300 식민지. 1: 1,000 희석 플레이트에는 약 10 개의 콜로니가 있으므로 샘플이 과도하게 희석되었음을 의미합니다. 그 플레이트는 CFU를 찾는 데 도움이되지 않습니다.
1:10 희석 판에는 300 개 이상의 콜로니가 있습니다. 이 경우 1: 100 플레이트로 이동할 수 있습니다. 이 접시에 식민지를 세고 179 개의 식민지가 있음을 알 수 있습니다. 이는 1: 100 희석액의 0.5 mL에 179 CFU가 포함되어 있음을 의미합니다. 그러나 원래 샘플은 어떻습니까?
CFU 계산이란?
이제 일부 데이터가 있으므로 원본 샘플에서 CFU 계산을 수행 할 수 있습니다.
1. 도금 한 양 (0.5mL)에 희석 계수 (0.01)를 곱하여 0.005를 산출합니다. CFU 수를 산출 한 희석 계수를 찾으려면이를 수행해야합니다. 여기에서 1: 100 희석액의 0.5 밀리리터를 사용하면 CFU를 계산할 수 있습니다.
2. 희석액 (179)에서 CFU를 단계 1 (0.005)의 결과로 나누어 35,800 CFU를 산출합니다.
이는 희석 된 원래 1 mL의 샘플에 35,800 CFU가 포함되어 있음을 의미합니다. 이것을 표현하는 또 다른 방법은 원래 샘플이 35,800 CFU / mL라는 것입니다.
CFU는 주어진 샘플에 얼마나 많은 박테리아, 곰팡이 또는 미생물이 있는지를 찾는 훌륭한 도구입니다. 여기에 설명 된 도금 방법은 액체 배양에서 잘 자라지 않는 고농축 샘플 또는 유기체에 특히 유용합니다.