როგორ გამოვთვალოთ KCAT და VMAX

მოლეკულების ან ორგანიზმების მცირე გამრავლების დროსაც კი შეიძლება დიდი დრო დასჭირდეს იმის შესამუშავებლად, რისი შესწავლაც გსურთ. პეტრიის ჭურჭელში არსებული ბაქტერიებისათვის რეაქციის სიჩქარე დამოკიდებულია იმაზე, თუ რამდენად ბევრია რეაქტიული ნივთიერება და ასევე ფერმენტების არსებობა. რაც არ უნდა იყოს შემთხვევა, შეგიძლიათ გამოიყენოთ განტოლებები ამ ბიოქიმიური რეაქციების სიჩქარის დასადგენად.

ფერმენტის კინემატიკა

ქიმიაშირეაქციის სიჩქარეაღწერილია გამოყენებითk ღირებულებებირომ იზომება რამდენად სწრაფი რეაქცია ხდება რეაქტიული ნივთიერებებისგან პროდუქტებზე. იმ რეაქციებისთვის, რომლებიც იყენებენ კატალიზატორებს, ბიოლოგიურ ნაერთებს, რომლებიც აჩქარებენ რეაქციის სიჩქარეს, სიჩქარეს,კატა, საშუალებას გაძლევთ განსაზღვროთ რეაქციის მაქსიმალური სიჩქარე.რეაქციის მაქსიმალური სიჩქარე​, ​მაქსიმალური, გიჩვენებთ რამდენი მოლეკულა გარდაიქმნება რეაქციის პროდუქტად, როდესაც ფერმენტი სრულად იხსნება თავად.

ფერმენტები აღწევენ ამ მაღალ სიჩქარეს რეაქციის აქტივაციის ენერგიის შემცირებით, ენერგიის ოდენობით, რაც საჭიროა რეაქციის წარმოსაქმნელად. როდესაც ფერმენტი უკავშირდება სუბსტრატს, მოლეკულას ან ნაერთებს, რომლებსაც აკვირდებით, ის ქმნის ფერმენტ-სუბსტრატის კომპლექსს. ისინი პირდაპირ გავლენას არ ახდენენ რეაქტივის ან პროდუქტის ნაერთების რა რაოდენობაზე, ასევე მათზე დამოკიდებულია სხვა ფაქტორებზე, როგორიცაა ფერმენტის კონცენტრაცია, ტემპერატურის pH და სიძლიერე იონურ შორის ობლიგაციები.

instagram story viewer

KCAT განტოლება

რეაქციის სიჩქარე საშუალებას გაძლევთ დაწეროთ განტოლებები იმის დასადგენად, თუ რამდენად იწვევს რეაქტივების სხვადასხვა რაოდენობას რამდენ პროდუქტამდე მიგიყვანთ. ძირითადი რეაქციისთვისxA + yB → zC(ანუ გარდაქმნაxmoles ofთანymoles ofმოსავლიანობაmoles of), კურსის განტოლება იქნება

r = k [A] ^ m \ ჯერ [B] ^ n

რეაქციის სიჩქარისთვისr,სიჩქარის მუდმივადა მოლური კონცენტრაციებიდაფრჩხილებით აღინიშნება. მ დაარიან ექსპონენტები, რომლებსაც თქვენ განსაზღვრავთ ექსპერიმენტების საშუალებით, რომლებიც იზომება რამდენად სწრაფი რეაქცია ხდება. ვ

ფერმენტ-კატალიზირებული რეაქციის კონკრეტული შემთხვევისთვის საწყისი სიჩქარე0არის

v_0 = \ frac {k_ {კატა}} {K_m}

საწყისი რეაქციის სიჩქარისთვის0. ეს სიჩქარე გიჩვენებთ ამაში კატალიზის სიჩქარესკატაფორმულაარისMichaelis-Menten მუდმივი, რომელიც შეგიძლიათ ექსპერიმენტულად გაზომოთ ან გამოთვალოთ სუბსტრატის კონცენტრაცია მაქსიმალური სიჩქარის ნახევარზე.

მუდმივას თავისი სახელი აქვსმიქაელისი-მენტენის განტოლება

v_0 = \ frac {v_ {max} \ ჯერ [S]} {K_m + [S]}

სუბსტრატის კონცენტრაციისთვის[S]და მაქსიმალური სიჩქარემაქსიმალურიგიჩვენებთ რამდენად სწრაფად ხდება ფერმენტული რეაქცია. როცა გამოთვლიკატა, თქვენ ასევე შეგიძლიათ დაწეროთ

v_0 = \ frac {k_ {cat} \ ჯერ [E] \ ჯერ [S]} {K_m}

როგორც რეაქციის სიჩქარის ზოგადი მეთოდი ფერმენტისა და სუბსტრატის კონცენტრაციებისთვის[E]და[S]შესაბამისად.

KCAT განტოლების სხვა მეთოდები 

ეს განსხვავებული განტოლებები საშუალებას მოგცემთ გამოიყენოთ ის, რაც ყველაზე შესაფერისია თქვენთვის ნებისმიერი მიზნისთვის, იქნება ეს ბაქტერიების გამრავლების სიჩქარე თუ საწვავსა და გაზს შორის ანთების სიჩქარე. თქვენ შეგიძლიათ გამოიყენოთ ეს განტოლებები, როგორც ექსპერიმენტული დაკვირვება თეორიულ მოდელებთან, ასევე გამოთვლები. თქვენ შეგიძლიათ გაეცნოთ Michaelis Menten განტოლების მეთოდების მნიშვნელობას რეაქციის სიჩქარის განსაზღვრის ამ სხვადასხვა გზით.

კატაგანტოლება ქმნის საფუძველს შექმნისთვისბიორეაქტორები. ეს არის სისტემები, რომლებიც მიკროორგანიზმებს ოპტიმალურ გარემოში ზრდის, რაც შეიძლება მეტ პროდუქტს აწარმოებს. აზიის ზოგიერთ ქვეყანაში ბიორეაქტორებს იყენებენ ფერმენტირებული საკვების მიღების დროსაც.

ზოგადად, ძალზე რთული ან შეუძლებელია იმის მნიშვნელობის დადგენადამატებითი ინფორმაციის გარეშე. მეცნიერები იყენებენ თანაფარდობასკატა / კმიმის გარკვევა, თუ რამდენად კონკრეტულად და ეფექტურად კავშირდება ფერმენტი სუბსტრატთან. ეს თანაფარდობა, ცნობილია როგორც სპეციფიკის მუდმივიSP, საშუალებას გაძლევთ შეცვალოთ მიქაელისი-მენტენის განტოლება, როგორც

v = \ frac {k_ {SP} [S]} {1+ \ frac {k_ {SP} [S]} {k_ {cat}}}

უფრო ზუსტი მნიშვნელობების გაზომვაSP​.

Teachs.ru
  • გაზიარება
instagram viewer