როგორ გამოვთვალოთ HPLC რეზოლუციები

ქიმიკოსები იყენებენ მაღალი ხარისხის თხევად ქრომატოგრაფიას ან HPLC ნაერთების ნარევების გამოყოფას. ზოგადად, მეთოდი მოიცავს სინჯის შეყვანას სვეტში, სადაც ის ერევა ერთ ან მეტ გამხსნელს. სხვადასხვა ნაერთები სხვადასხვა ხარისხით ადსორბირდება სვეტში ან "ჯოხი"; და როგორც გამხსნელი უბიძგებს ნაერთებს სვეტის გავლით, ნარევის ერთ-ერთი კომპონენტი პირველი გამოვა სვეტიდან. ინსტრუმენტი აფიქსირებს ნაერთებს სვეტიდან გამოსვლისას და წარმოქმნის ქრომატოგრამას, რომელიც შედგება ნახაზისგან, რომლის შეკავება ხდება x ღერძზე და სიგნალის ინტენსივობა detector- დან y ღერძზე. როდესაც ნაერთები გამოდიან სვეტიდან, ისინი წარმოქმნიან "მწვერვალებს" ქრომატოგრამაში. ზოგადად, რაც უფრო შორსაა და ვიწროა მწვერვალები ქრომატოგრამაში, მით უფრო მაღალია გარჩევადობა. მეცნიერები თვლიან, რომ 1,0 ან მეტი რეზოლუცია წარმოადგენს ადეკვატურ გამოყოფას.

გაზომეთ ორი მომიჯნავე მწვერვალის სიგანე ქრომატოგრამაში იმის მითითებით, თუ სად არის x ღერძის მნიშვნელობები თითოეული მწვერვალის ძირში. X ღერძი წარმოადგენს შენარჩუნების დროს, რომელიც ჩვეულებრივ წამებში იზომება. ამრიგად, თუ პიკი იწყება 15,1 წამში და მთავრდება 18,5 წამში, მისი სიგანეა (18,5 - 15,1) = 3,4 წამში.

განსაზღვრეთ შეკავების დრო იმ დროის, ანუ x- ღერძზე მდებარეობის მითითებით, რომელიც შეესაბამება მწვერვალების მაქსიმუმის ადგილებს. ეს მნიშვნელობა ჩვეულებრივ იქნება შუა ნაწილამდე მიმავალ ორ მნიშვნელობას შორის, რომლებიც გამოიყენება 1-ლი საფეხურის სიგანის გამოსათვლელად. მაგალითად, 1-ლი ნაბიჯით მოცემული მაგალითი მაქსიმუმ 16,8 წამს გამოიჩენს.

გამოთვალეთ რეზოლუცია, R, ორ მწვერვალს შორის:

R = \ frac {RT_1-RT_2} {0,5 (W_1 + W_2)}

სადაც RT1 და RT2 წარმოადგენს 1 და 2 მწვერვალების შეკავების დროს და W1 და ვ2 წარმოადგენს მათ ფუძეებში აღებული მწვერვალების სიგანეებს. მე –2 და მე –3 საფეხურებიდან მაგალითის გაგრძელება, ერთ მწვერვალს აჩვენებს შენარჩუნების დრო 16,8 წამს და სიგანე 3,4 წამს. თუ მეორე მწვერვალს გამოავლინა შენარჩუნების დრო 21,4 წამში, სიგანე 3,6 წამში, მაშინ რეზოლუცია იქნება:

R = \ frac {21.4-16.8} {0.5 (3.4 + 3.6)} = 1.3

რაც დაგჭირდებათ

  • HPLC ქრომატოგრამა
  • კალკულატორი
  • გაზიარება
instagram viewer