დნმ
დეოქსირიბონუკლეინის მჟავა და ცილები. დნმ ორგანიზებულია ერთეულებად, რომლებსაც გენები ეწოდება, რომელთაგან თითოეული კოდირებს კონკრეტულ RNA ან ცილის თანმიმდევრობას. გენების შესწავლა ხდება ბიოლოგიური სტრუქტურისა და ფუნქციონირების, ევოლუციის, დაავადებების და საცხოვრებელი სისტემის მრავალი სხვა ასპექტის გასაცნობად. გენების დეტალური შესასწავლად დნმ უნდა იყოს იზოლირებული და განწმენდილი იყოს საინტერესო უჯრედებისგან.
დნმ ექსტრაქცია
მიუხედავად იმისა, რომ ერთი უჯრედის დნმ-ის მოპოვება და შესწავლაა შესაძლებელი, ეს საკმარისი არ არის შეუიარაღებელი თვალით. ტალღის მისაღებად საკმარისი რაოდენობის მისაღებად, რაც მეტ უჯრედთან უნდა იმუშაოთ უკეთესად (მრავალი მილიონი).
ზუსტი პროტოკოლები მნიშვნელოვნად განსხვავდება კონკრეტული ნიმუშების უნიკალური მახასიათებლების გათვალისწინებით, მაგრამ ზოგადი ნაბიჯებია ჰომოგენიზაცია, ლიზი, მონელება, გამოყოფა და შეგროვება. პროცედურა საუკეთესოდ ტარდება მცირე ზომის (ნიმუშის ზომის მიხედვით) მინის ან პლასტმასის მილში.
ნიმუში ზოგადად არის შერწყმული ან დაფქვილი, რათა უჯრედები ერთმანეთისგან საფუძვლიანად გამოიყოს. ეს უჯრედის ინგრედიენტებს უფრო ხელმისაწვდომს ხდის შემდგომი რეაგენტებისათვის. შემდეგ ჰომოგენატს ემატება სარეცხი ან ფერმენტები, რათა მოხდეს უჯრედის მემბრანის (და ბირთვული მემბრანის უჯრედები ევკარიოტული) ლიზირება, რათა განთავისუფლდეს დნმ. ამ ეტაპზე, დნმ გარშემორტყმულია ცილებით, ლიპიდებით, ნახშირწყლებით, ყველაფერი, რაც უჯრედებში იყო.
შეიძლება შემდგომი ფერმენტული მონელება იყოს საჭირო ცილების დასაშლელად, რათა ისინი არ დაუკავშირდნენ დნმ-ს და არ შეუშალონ მას შეგროვება. დნმ გამოყოფილია უჯრედის დანარჩენი შინაარსისაგან ცივი, სუფთა, ეთილის ან იზოპროპილის სპირტის დამატებით. დნმ არ არის ხსნადი ამ სპირტებში, ამიტომ შედედდება მისი ალკოჰოლთან კონტაქტის შემცირების მცდელობა. შედედებული დნმ-ის შეგროვება ხდება, ჩვეულებრივ, ცენტრიფუგაციით ან დატრიალებით.
დნმ დატრიალება
დნმ – ის შეგროვება ეფექტურია, როდესაც ექსტრაქციის პროცედურის შედეგად მიიღება დიდი რაოდენობით დნმ. ეს ასევე არის შესანიშნავი სადემონსტრაციო მეთოდი, რადგან სუფთა დნმ-ის შთამბეჭდავი ჩახლართვა აშკარად ჩანს.
დნმ-ის დატრიალებისთვის გამოყოფის ეტაპი უნდა განხორციელდეს ფრთხილად. თუ ეს არ იყო ლიზისის რეაგენტის ნარევის შემადგენელი ნაწილი, ალკოჰოლის დამატების ეტაპამდე ხსნარს უნდა დაემატოს კონცენტრირებული მარილის ხსნარი (ნატრიუმის ქლორიდი). ცივ ალკოჰოლს ნელა ასხამენ სინჯარის მხარეს და ქმნიან წყალხსნარს ზემოდან ფენის წარმოქმნას, შერევის თავიდან ასაცილებლად. თუ სწორად გაკეთდა, ალკოჰოლი შექმნის საკუთარ ფენას მარილიანი ფენის თავზე. შემდეგ ხდება spooling.
მარილიანი ფენისგან დნმ-ის შესაგროვებლად ფრთხილად მოათავსეთ შუშის შემრევი ჯოხი ალკოჰოლის ფენაში, სანამ მილის ფსკერს არ შეეხება. ნელა დაატრიალეთ ჯოხი თითებს შორის, ხოლო ორ ფენას შორის ინტერფეისის ყურებისას. საკმარისი დნმ-ის არსებობის შემთხვევაში, იგი იკრიბება შრეებს შორის ინტერფეისზე და წარმოქმნის რძიან გამჭვირვალე მასას. დაატრიალეთ ჯოხი, რომ დნმ შემოიხვიოთ გარშემო (ეს არის დასიებული ნაწილი) და გამოიყვანეთ იგი მილიდან. დნმ შეიძლება გადავიდეს სუფთა ალკოჰოლის სხვა მილში შენახვის ან შემდგომი ანალიზისთვის.