სპექტროფოტომეტრია ფასდაუდებელი იარაღია ქიმიასა და ბიოლოგიაში. ძირითადი იდეა მარტივია: სხვადასხვა ნივთიერებები გარკვეულ ტალღის სიგრძეზე უკეთესად ითვისებენ სინათლეს / ელექტრომაგნიტურ გამოსხივებას, ვიდრე სხვები. ამიტომ, ზოგიერთი მასალა გამჭვირვალეა, ზოგი ფერადია, მაგალითად. როდესაც მოცემული ტალღის სიგრძის შუქს ხსნარის საშუალებით ანათებთ, რაც უფრო მაღალია მისი კონცენტრაცია, მით მეტ შუქს შეიწოვს იგი. კონცენტრაციის გამოსათვლელად, თქვენ უნდა შეადაროთ თქვენი კითხვა კითხულობებს ცნობილი კონცენტრაციის სტანდარტებისთვის. ქვემოთ მოცემული პროცედურა საკმაოდ ზოგადი პროცედურაა, რომელიც დაწერილია ქიმიის სასწავლო ლაბორატორიის გათვალისწინებით, მაგრამ ის შეიძლება შეიცვალოს სხვა პარამეტრებისთვისაც.
როგორც ყოველთვის ლაბორატორიაში მუშაობისას, ჩაიტარეთ სათვალე, ხელთათმანები და გრძელი მკლავი, რათა უზრუნველყოთ საკუთარი უსაფრთხოება.
შესუსტეთ რეზინის ბოლქვი, რომ დაიცვას იგი ჰაერიდან, შემდეგ განათავსეთ იგი თქვენი დამთავრებული პიპეტის თავზე და დაუშვით ბოლქვის მოდუნება, ასე რომ ის წყალს მიწოვს პიპეტში. შემდეგ ამოიღეთ ბოლქვი და თითის პიპეტის თავზე გადააფარეთ; ეს დალუქავს პიპეტს ისე, რომ შიგნით გამოსავალი არ გადმოედინება, სანამ თითს არ მოიშორებთ. თითის ზღვარი ოდნავ ასწიეთ, რომ პიპეტიდან გამოვიდეს მცირე ხსნარი, სანამ არ მიაღწევთ სასურველ მოცულობას. ივარჯიშეთ წყლით და ჭიქით, რომ გაეცნოთ დამთავრებული პიპეტის მუშაობას. რესურსების განყოფილების ბმულს აქვს ფილმი, რომელიც აჩვენებს თუ როგორ უნდა გამოიყენოთ პიპეტი იმ შემთხვევაში, თუ აქამდე არასდროს მუშაობდით.
ეტიკეტირება 5 სინჯარა 1-5 სტანდარტად. თქვენ შეგიძლიათ შეაფასოთ ისინი ნიღბიანი ფირის და კალმის გამოყენებით ან მშრალი წაშლის მარკერის გამოყენებით.
თქვენი სტანდარტებისთვის აირჩიეთ ხუთი კონცენტრაცია. გსურთ, რომ სტანდარტული კონცენტრაციები ერთმანეთისგან გამოყოფილი იყოს დაახლოებით იგივე ინტერვალით - მაგალითად, 0,1 მოლარი, 0,2 მოლარი, 0,3 მოლარი და ა.შ. - და დაახლოებით იმავე დიაპაზონში, როგორიც იქნება თქვენი უცნობი. ამ დროისთვის გამოიყენეთ შემდეგი ხუთი კონცენტრაცია, მაგრამ გახსოვდეთ, რომ ამის შეცვლა მოგიწევთ საკუთარი ექსპერიმენტის ჩატარებისას:
სტანდარტული 1: 0.1 მოლური სტანდარტული 2: 0.2 მოლური სტანდარტული 3: 0.3 მოლური სტანდარტული 4: 0.4 მოლური სტანდარტული 5: 0.5 მოლური
შემდეგ აიღეთ 1 მოლური სტანდარტული ხსნარი და დაამატეთ შემდეგი რაოდენობა 1-5 სინჯარებში. გახსოვდეთ, რომ ეს თანხები გამოითვლება ზემოთ ჩამოთვლილი კონცენტრაციების გამოყენებით, ამიტომ შეიძლება დაგჭირდეთ მათი შეცვლა საკუთარი ექსპერიმენტის ჩატარებისას.
სტანდარტული 1: 0.8 მილილიტრი სტანდარტული 2: 1.6 მილილიტრი სტანდარტული 3: 2.4 მილილიტრი სტანდარტული 4: 3.2 მილილიტრი სტანდარტული 5: 4 მილილიტრი
ჩამოიბანეთ დამთავრებული პიპეტი, შემდეგ გადაიტანეთ დეიონიზირებული წყლის შემდეგი რაოდენობა:
სტანდარტული 1: 7.2 მილილიტრი სტანდარტული 2: 6.4 მილილიტრი სტანდარტული 3: 5.6 მილილიტრი სტანდარტული 4: 4.8 მილილიტრი სტანდარტული 5: 4.0 მილილიტრი
ძირითადად, იდეა ის არის, რომ თითოეულ მილში ხსნარის რაოდენობა 8 მილილიტრამდე მივიდეს.
თითოეულ სტანდარტულ მილს დაახურეთ პარაფილმი და გადაატრიალეთ, რომ აურიოთ.
მონიშნეთ კიდევ ხუთი სინჯარა, როგორც "უცნობი 1-5". თითოეულს დაუმატეთ იგივე რაოდენობით თქვენი უცნობი ან საცდელი ხსნარი, როგორც სტანდარტებისთვის გამოიყენეთ 1 მოლარული ხსნარი. სხვა სიტყვებით რომ ვთქვათ, უცნობი 1 შეიცავს 0,8 მილილიტრ ტესტის ხსნარს და 7,2 მილილიტრს წყალი, უცნობი 2 შეიცავს 1,6 მილილიტრ ტესტის ხსნარს და 6,4 მილილიტრ წყალს და ა.შ. მეოთხე
დააფარეთ თითოეული უცნობი პარაფილმით და ფრთხილად გადააქციეთ ავურიოთ.
ჩართეთ სპექტროფოტომეტრი და მიეცით საშუალება გახურდეს. საჭირო დროის ხანგრძლივობა დამოკიდებულია მოდელზე და მწარმოებელზე.
დააყენეთ ტალღის სიგრძე სპექტროფოტომეტრზე. ტალღის სიგრძე დამოკიდებული იქნება თქვენს ექსპერიმენტში ქიმიური ნივთიერების ტიპზე. ახლა მიიღეთ 500 ნმ, თუმცა გახსოვდეთ, რომ ამის შეცვლა სხვადასხვა ექსპერიმენტისთვის დაგჭირდებათ.
დაკალიბრება თქვენი სპექტროფოტომეტრი. დაკალიბრების პროცედურა განსხვავდება თქვენი მოწყობილობიდან გამომდინარე. Spectronic 20-ისთვის, ლაბორატორიების სწავლების საერთო მოდელი, თქვენ ჯერ დაარეგულირებთ მანქანას ისე, რომ მასში ჩაიწეროს "0 პროცენტი T" როდესაც არ არის დატვირთული კუვეტი, შეცვალეთ იგი ისე, რომ წაიკითხოს "100% T", როდესაც მხოლოდ ცარიელი კუვეტი შეიცავს დეიონიზირებულ წყალს დატვირთული. ეს პროცედურები შეიძლება განსხვავდებოდეს იმის მიხედვით, თუ რა ტიპის მანქანას იყენებთ, დეტალებისთვის გაეცანით მწარმოებლის მითითებებს.
აპარატის დაკალიბრების შემდეგ აიღეთ სტანდარტული 1 სინჯარა და დაასხით შინაარსი სუფთა კუვეტში, სანამ არ მიაღწევენ შევსების ხაზს. წაიწმინდეთ კუვეტი kimwipe- ით, თითის ანაბეჭდის ან სხვა ჭუჭყის მოსაშორებლად. ჩადეთ კუვეტი სპექტროფოტომეტრში და ჩაიწერეთ "% T" კითხვა.
გაიმეორეთ ეს პროცედურა 10-ვე ნიმუშისთვის. დაიცავით კუვეტის დასუფთავება ნიმუშებს შორის, რათა დარწმუნდეთ, რომ თქვენი შედეგები მაქსიმალურად ზუსტია.
მიიღეთ შედეგები თქვენი სტანდარტებისთვის და შეიტანეთ ისინი ცხრილების / გრაფიკის პროგრამაში, როგორიცაა Excel ან OpenOffice.
ცხრილების პროგრამის გამოყენებით, 100 პროცენტი გაყავით სტანდარტებისთვის "% T" მნიშვნელობებზე და შემდეგ აიღეთ შედეგების ჟურნალი. ეს გაანგარიშება მოგცემთ შთანთქმას. თუ ფორმულა შეიტანეთ, თქვენი ცხრილი პროგრამა გაანგარიშებას გააკეთებს თქვენთვის.
მაგალითი: თუ% T არის 50.6, ფორმულა თქვენ შეიტანეთ ცხრილების პროგრამაში შემდეგი იქნება:
ჟურნალი (100 / 50.6)
ცხრილების პროგრამა შეასრულებს არითმეტიკას.
იგივე გააკეთე ხუთივე უცნობი / ექსპერიმენტული მნიშვნელობისთვის.
აიღეთ შთანთქმის მნიშვნელობები ხუთივე სტანდარტისთვის, კონცენტრირება x ღერძზე და შთანთქმის y ღერძზე. ცხრილების პროგრამის გამოყენებით, ამ გრაფაში მოათავსეთ წრფივი განტოლება. განტოლება იქნება y = mx + b ფორმის. ცხრილების უმეტეს პროგრამებს ექნებათ ხაზოვანი რეგრესიის ფუნქცია. გაეცანით მომხმარებლის სახელმძღვანელოს თქვენი ცხრილების პროგრამისთვის, თუ რას იყენებთ ხაზოვანი უკუგანვითარების ფუნქციის შესახებ.
თქვენი ცხრილების პროგრამიდან აიღეთ განტოლება საუკეთესოდ მორგებული ხაზისთვის და ამოხსენით y- ს, გამოაკელით b ორივე მხარეს და გაყოფთ ორივე მხარეს m. შედეგი შემდეგნაირად გამოიყურება:
(y - ბ) / მ = x
სადაც b და m არის თქვენი ცხრილების პროგრამის მიერ ნაპოვნი მნიშვნელობები.
შეამოწმეთ თქვენი შთანთქმის მნიშვნელობები უცნობიდან და აირჩიეთ სამი, რომლებიც სტანდარტების იმავე დიაპაზონშია. გამოიყენეთ ეს სამი შთანთქმის მნიშვნელობა თქვენი დარჩენილი გაანგარიშებისთვის. თუ ხუთივე სტანდარტის იმავე დიაპაზონში მოხვდება, ამის ნაცვლად შეგიძლიათ ხუთივე გამოიყენოთ, მაგრამ მინიმუმ სამი უნდა გამოიყენოთ.
შთანთქმის სამი სამი მნიშვნელობიდან ჩასვით თქვენი განტოლება y –ის ნაცვლად. გახსოვდეთ, რომ თქვენი განტოლება შემდეგ ფორმაში იყო:
(y - ბ) / მ = x
ასე რომ, თქვენ გსურთ შეიტანოთ შთანთქმის მნიშვნელობა თითოეული უცნობი განტოლების ნაცვლად y, შემდეგ გამოთვალოთ x. შეგიძლიათ გამოიყენოთ ცხრილების პროგრამა, რომ ეს გაანგარიშოთ თქვენთვის და ის უფრო სწრაფად გახადოთ. თქვენ გამოთვალეთ საინტერესო ქიმიური ნივთიერების კონცენტრაცია თქვენს სამ განზავებულ უცნობში. ორიგინალი ხსნარი განზავდეს ამ უცნობების მოსამზადებლად, თუმცა ახლა თქვენ უნდა იმუშაოთ უკან და გაანგარიშოთ ორიგინალური ხსნარის კონცენტრაცია განზავების ფაქტორის საფუძველზე.
თქვენს მიერ სპექტროფოტომეტრში ჩასმული თითოეული უცნობი ნიმუში განზავებულია სხვადასხვა რაოდენობით. შესაბამისად, თქვენ უნდა გაყოთ თქვენი კონცენტრაცია, რომელიც გამოითვალეთ ყოველი უცნობი მოსმენით მიღებული შთანთქმის საფუძველზე შემდეგზე:
უცნობი 1: გაყოფა 0.1-ზე უცნობი 2: გაყოფა 0.2-ზე უცნობი 3: გაყოფა 0.3-ზე უცნობი 4: გაყოფა 0.4-ზე უცნობი 5: გაყოფა 0.5-ზე
ამასთან, გახსოვდეთ, რომ ეს ციფრები ემყარება დაშვებას, რომ თქვენ იყენებთ ზემოთ აღწერილ განზავებებს. გახსოვდეთ, რომ შეცვალეთ ეს მნიშვნელობები, თუ თქვენი ნიმუშები სხვა რაოდენობით გაზავდით.
დაამატეთ თქვენი შედეგები ერთად და დაყავით შედეგების რაოდენობაზე. ეს მოგცემთ საშუალოდ. შეატყობინეთ ამ ნომერს, როგორც ორიგინალ ხსნარის კონცენტრაციის მიგნებას.
რაც დაგჭირდებათ
- ფანქარი
- ქაღალდი
- კალკულატორი
- ხელთათმანები
- სათვალე
- გრძელი მკლავი
- სპექტროფოტომეტრი
- შუშის კუვეტები
- პარაფილმი
- Kimwipes
- დეიონიზირებული წყალი
- გამოსავალი, რომლის გამოცდაც გსურთ (უცნობი კონცენტრაციის)
- თქვენს ტესტის ხსნარში არსებული ქიმიური ნივთიერების 1 მოლური სტანდარტული ხსნარი
- დაამთავრა პიპეტი და ბოლქვი
- სინჯარა და სინჯარა
- ჭიქა
Რჩევები
ეს პროცედურა შეიძლება რთულად ჟღერდეს, მაგრამ სინამდვილეში საკმაოდ მარტივია, როდესაც დაიწყებთ. სცადეთ უყუროთ ორ ვიდეოს რესურსების განყოფილებაში, რომ გაეცნოთ პროცედურას.