HPLC ძირითადი კომპონენტები

მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფია არის ნარევის ლაბორატორიული ანალიზის ტექნიკა. ეს არის ეფექტური ტიპის ქრომატოგრაფია, რომელიც იყენებს მაღალ წნევას და არა უბრალოდ მიზიდულობას, ნარევის ნიმუშის სვეტის გასაღებად. ინერგება ნიმუში, შემდეგ ტუმბო, რომელიც შეიცავს დიდი რაოდენობით წნევას, ხელს უწყობს ნიმუშის გადატანას შეფუთული სვეტის გასწვრივ, სადაც იგი გამოყოფილია ცალკეულ კომპონენტებად. შემდეგ ამ გამოყოფას აანალიზებს დეტექტორი, შედეგების მისაღებად.

იმისათვის, რომ გაუკეთონ HPLC, ნიმუში ჯერ უნდა დაიშალა პოლარულ თხევად გამხსნელში, სასურველია ის, ვისაც აქვს ცნობილი HPLC სპექტრი, რათა მისი მონაცემები განასხვავონ ნიმუშისაგან. ნიმუშის შემცველი თხევადი ხსნარი მოთავსებულია ინსტრუმენტში და იგზავნება სვეტში. ინექციის ადგილის რეალური მდებარეობა დამოკიდებულია ინსტრუმენტების ბრენდზე. უმეტეს შემთხვევაში, ინექციის პროცესი ავტომატიზირებულია, მაგრამ ზოგიერთ შემთხვევაში ლაბორატორიის მუშაკმა უნდა შეასრულოს ნიმუში მცირე შპრიცის ნემსის გამოყენებით.

HPLC დანადგარის ტუმბოს კომპონენტი აუცილებელია, რადგან ის უზრუნველყოფს წნევას, რომელიც ნიმუშს სვეტის გავლით უბიძგებს. ტუმბოს სიმძლავრე განსხვავდება, მაგრამ ძლიერი შეიძლება წარმოქმნას წნევა 6000 psi- მდე, ან ფუნტი კვადრატულ დიუმზე, რომელიც გამოიყენება ნიმუშის ინექციის შემდეგ. ეს საშუალებას აძლევს ნიმუშს სვეტში უფრო სწრაფად და ეფექტურად გაიაროს, ვიდრე წვეთოვანი მხოლოდ სიმძიმის ძალის გამოყენებით.

ტუმბოს მიერ სვეტში გატარებული ნიმუშის გაზრდილი სიჩქარე საშუალებას იძლევა გამოიყენოთ სხვა ტიპის სვეტი, ვიდრე ეს გამოიყენება თხევად ქრომატოგრაფიაში. სვეტში შესაფუთ მასალას შეიძლება ჰქონდეს ნაწილაკების გაცილებით მცირე ზომა, რაც ზრდის ზედაპირის ზონას და, შესაბამისად, ეხმარება ნიმუშის ურთიერთქმედებას სვეტთან. HPLC სვეტების უმეტესობა მუშაობს პოლარობის საშუალებით. ნიმუში იხსნება პოლარულ გამხსნელში, ხოლო სვეტი შედგება ძირითადად არაპოლარული ნახშირწყალბადებისაგან. ნიმუშის მოლეკულის პოლარული ნაწილები ძალიან სწრაფად გადიან სვეტში, რადგან ისინი, პირველ რიგში, ურთიერთქმედებენ გამხსნელი, მაშინ როდესაც ნიმუშის არაპოლარული კომპონენტები სვეტში რჩება, სუსტ ურთიერთქმედებას ქმნის სვეტთან კომპონენტები. ამიტომ, ნიმუშის კომპონენტები სვეტიდან გამოდიან უმეტეს პოლარულიდან არაპოლარულზე.

დეტექტორები ასევე განსხვავდება HPLC ინსტრუმენტის ტიპის მიხედვით. ამასთან, უმეტესობა იმავე ძირითადი გზით ფუნქციონირებს. ულტრაიისფერი სინათლის წყარო სვეტიდან გამოსვლისას ანათებს გამოყოფილ ნიმუშის კომპონენტებს. ორგანული ნაერთების უმრავლესობა შთანთქავს გარკვეულ რაოდენობას სინათლისგან, ასე რომ, როდესაც ისინი გადიან გამოყენებულ სინათლის სხივს, დეტექტორს შეუძლია აიღოს რამდენი შუქი შეიწოვება. დეტექტორი ასევე აფიქსირებს კომპონენტების შენარჩუნების დროს სვეტიდან გამოსვლის თანმიმდევრობით. ამ შედეგის ანალიზი შეიძლება შეფასდეს პიკის ფართობიდან გამომდინარე, რათა დადგინდეს სინჯის კომპონენტების ზუსტი ხასიათი.