Scienziati e ricercatori studiano la crescita batterica preparando colture in laboratorio. Piastre Petri contenenti agar nutriente coltivano colture batteriche da una singola passata o inoculazione. Gli studenti possono preparare l'agar nutriente a casa utilizzando forniture di generi alimentari o negozi di alimenti naturali per un progetto di fiera della scienza. Gli elettrodomestici da cucina convenzionali e gli utensili da cucina di base forniscono gli strumenti per preparare un terreno di coltura sterile che può essere dispensato in piastre di Petri. Seguire tecniche sterili riscaldando i materiali e mantenendo le superfici pulite e asciutte migliorerà i risultati impedendo che muffe e particelle contaminino la coltura.
Metti un filtro da caffè in un colino e appendi il colino sopra l'apertura della ciotola trasparente.
Versare lentamente il brodo nel filtro, facendo attenzione che il brodo non fuoriesca dai lati del filtro. Se il filtro si intasa di particelle, rimuovere il filtro usato, sostituirlo con un filtro pulito e continuare a versare il brodo.
Rimuovere il colino e il filtro dalla parte superiore della ciotola e osservare se il brodo appare limpido (cioè, non ci sono particelle sospese nel liquido). Se le particelle galleggiano nel liquido, ripetere i passaggi 1 e 2 utilizzando una seconda ciotola trasparente e un filtro per caffè fresco.
Metti la pentola sul fuoco e versaci il brodo chiaro.
Aggiungere 16 once di acqua distillata nella pentola contenente il brodo.
Accendi il fornello e regola il fuoco a medio-basso. Riscaldare il brodo a fuoco lento (cioè compariranno piccole bolle vicino al lato della pentola).
Aggiungere 1 cucchiaino di polvere di agar-agar al brodo bollente (circa 2,5 grammi) e mescolare il composto fino a quando la polvere non si sarà sciolta. Assicurati di mescolare la polvere per scioglierla ed evitare che la gelatina affondi sul fondo della pentola (dove può bruciare).
Ripetere il passaggio 7 fino a quando tutta la polvere di agar-agar è stata sciolta nel brodo.
Continuare a mescolare il brodo per circa 1 minuto per assicurarsi che tutta la polvere sia completamente sciolta.
Spegnete il fuoco, mettete il coperchio sulla pentola e lasciate raffreddare il liquido per almeno 15 minuti.
Disporre le piastre di Petri sterili in fila per un facile montaggio, ma non rimuovere i coperchi. Se lo si desidera, posizionare un sottopentola per tenere la pentola calda. Se stai usando tazze per crema pasticcera con coperchio invece di piastre di Petri, sterilizza le tazze per crema mettendo le tazze e i coperchi capovolto (capovolto) su una teglia ricoperta di carta stagnola e cuocere in forno per almeno un'ora a 375 gradi Fahrenheit. Assicurarsi che le tazze e i coperchi sterilizzati siano completamente raffreddati prima dell'uso.
Tocca con cura l'esterno della pentola per verificare che sia caldo al tatto e posiziona la pentola sul sottopentola. Se la pentola è troppo calda per essere toccata, aspetta almeno 10 minuti per far raffreddare la pentola.
Togliere il coperchio e mettere da parte. Metti il mestolo nella pentola.
Rimuovere il coperchio da una capsula di Petri e versare il brodo nutriente per riempire la piastra a metà. Coprire subito il piatto con il suo coperchio.
Ripetere il passaggio 14 per ciascuna delle piastre di Petri.
Lasciare solidificare il brodo nutriente nelle piastre di Petri per almeno 1 ora, indisturbato.
Scuotere delicatamente le piastre di Petri da un lato all'altro per verificare che il brodo nutriente si sia completamente solidificato. Se il brodo non è completamente gelificato, attendi altri 20 minuti prima di ricontrollare.
Copri un tavolo o una superficie piana con un rotolo di carta assorbente per creare un'area di lavoro sterile. Strappa un foglio di carta assorbente e piegalo quattro volte per creare uno spesso batuffolo rettangolare. Metti questo batuffolo su un'estremità dell'area di lavoro.
Trasferire una capsula di Petri nell'area di lavoro sterile e rimuovere il coperchio. Capovolgi con cautela il piatto e posiziona un'estremità sul lato del batuffolo piegato, in modo che sia capovolto e leggermente inclinato (con un leggero spazio rispetto al batuffolo di carta).
Capovolgi il coperchio e posizionalo sopra la capsula di Petri sulla superficie di lavoro sterile. Se compaiono gocce d'acqua sul coperchio, scuotere delicatamente l'umidità prima di posizionarla sulla superficie coperta, ma non toccare l'interno del coperchio.
Ripeti i passaggi 19 e 20 per ciascuna capsula di Petri, posizionando un lato della capsula capovolta sul lato della capsula precedente anziché sul batuffolo di carta assorbente. I piatti appariranno come un insieme sfalsato, con spazi vuoti su un lato in modo che l'umidità in eccesso possa evaporare.
Guarda le capsule di Petri capovolte per verificare se l'umidità sui lati delle piastre è evaporata. Una volta che tutta l'umidità è stata eliminata, girare i piatti con il lato destro rivolto verso l'alto e coprire immediatamente con i coperchi per l'uso.
Inoculare l'agar nutriente sulla piastra strofinando un tampone contenente la coltura desiderata sulla superficie dell'agar nutriente prima di coprire con il coperchio. Capovolgi la capsula di Petri in modo che il solido sia sopra. Conservare la capsula di Petri inoculata con il solido sulla parte superiore per la coltura e il coperchio sul fondo per raccogliere umidità, particelle sciolte o crescita.
Cose di cui avrai bisogno
- Filtri per caffè
- Filtro
- 2 ciotole grandi e trasparenti
- 16 once. brodo di manzo senza grassi
- 16 once. acqua distillata
- Pentola con coperchio
- Stufa
- 10 grammi di agar agar
- Misurino
- agitatore
- Rotolo di carta assorbente
- Presine
- Mestolo di metallo
- Piastre di Petri sterili o tazze di crema pasticcera trasparenti con coperchi
- Opzionale: timer, sottopentola, forno, padella, foglio di alluminio, padella
Suggerimenti
Se appare eccessiva umidità sui coperchi, asciugare e sterilizzare i coperchi nel forno impostato a 375 gradi Fahrenheit per almeno 1 ora (assicurarsi di mettere i coperchi in una teglia pulita foderata con un foglio di alluminio prima di metterli nel forno).
Avvertenze
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Fare attenzione quando si maneggia la pentola calda per evitare ustioni. Se il lato della pentola è troppo caldo, il liquido nella pentola è molto caldo. Il brodo nutriente dovrebbe essere caldo per essere erogato nelle piastre, ma non troppo caldo per produrre un'eccessiva condensa nelle piastre di Petri durante il raffreddamento e l'impostazione.
Non toccare l'interno della capsula di Petri (cioè piastra o coperchio) per evitare di introdurre batteri indesiderati nella coltura.