Le soluzioni tampone resistono alle variazioni di pH perché contengono deboli coniugati acido-base che neutralizzano gli ioni H+ e OH-. Le soluzioni tampone sono costituite da acidi o basi deboli e dal sale di quell'acido o base. La selezione di un sistema tampone appropriato dipende dall'intervallo di pH per il tampone. La maggior parte delle reazioni biologiche si verifica a un intervallo di pH compreso tra 6 e 8. I tamponi fosfato tamponano nell'intervallo di pH compreso tra 6,5 e 7,5. I tamponi di acido carbossilico sono utili da pH 3 a 6. I tamponi borato funzionano da pH 8,5 a 10. I tamponi di aminoacidi come la glicina e l'istidina si comportano in una varietà di intervalli di pH. Il tampone Tris è uno dei sistemi tampone più comunemente usati nei laboratori di biologia. Nell'esempio seguente verranno utilizzati i calcoli per una soluzione tampone Tris, ma la metodologia si applica a qualsiasi soluzione tampone.
Utilizzare il prodotto della molarità e del volume della soluzione finale per determinare le moli di base richieste. Ad esempio, se sono necessari 2 litri di una soluzione 0,1 M di tampone Tris, il numero di moli di Tris richiesto è:
Calcolare la massa di tampone richiesta moltiplicando il numero di moli necessarie per il peso molecolare della base. Ad esempio, la massa di 0,2 moli di base Tris è uguale a:
Sciogliere la base in acqua distillata utilizzando un'ancoretta magnetica e una piastra riscaldante. Scioglierlo in un volume di acqua solo leggermente inferiore al volume della soluzione finale (da 950 a 975 ml per ogni litro di soluzione finale). Il pH del tampone Tris cambia con la concentrazione e necessita di un riaggiustamento se viene utilizzato un volume iniziale troppo piccolo. È anche meglio preparare il tampone alla stessa temperatura che verrà utilizzata durante il test o l'esperimento poiché Tris ha grandi variazioni di pH dipendenti dalla temperatura.
Suggerimenti
- Per risparmiare tempo durante la preparazione di una soluzione tampone, è possibile utilizzare concentrati tampone preconfezionati al pH richiesto e diluire per la molarità e il volume desiderati. Preparare la soluzione tampone alla stessa temperatura che verrà utilizzata per evitare variazioni significative del pH. Evitare regolazioni del pH che richiedono tempo, titolare solo dopo aver diluito alla concentrazione desiderata. La dissoluzione in un volume troppo piccolo porterà a titolazioni ripetute.
Avvertenze
- Prestare attenzione quando si maneggiano acidi e basi. Indossare occhiali protettivi.
Circa l'autore
Carla Boulianne è una biologa evoluzionista per formazione e scrittrice freelance per passione. Oltre a scrivere per Demand Studios ed eHow, è autrice di lungometraggi per Parenting a Gifted Child su Suite101.com. Si emoziona nell'esplorare nuovi argomenti attraverso ricerche approfondite.
Crediti fotografici
Foto per gentile concessione di Emmi P. @morgueFile.com
