Enterobacter aerogenes e altre specie di Enterobacteriaceae sono facili da identificare utilizzando il kit di test API-20E. Questo kit, prodotto da bioMeriuex Inc., include 20 mini-tubi o pozzetti per il test. Il test consiste nell'inoculazione di una sospensione batterica pura nei pozzetti del test e nella lettura delle reazioni cromatiche che si verificano. L'identificazione si basa sulla conversione dei risultati di queste reazioni cromatiche in un codice a sette cifre noto come Analytical Profile Index. La corrispondenza di questo codice con il database del produttore fornisce un'identificazione dell'organismo.
Aprire una fiala contenente 5 ml di mezzo di cloruro di sodio 0,85%. Rimuovere una singola colonia da una piastra di isolamento di 18-24 ore con una pipetta e aggiungerla all'ampolla. Mescolare per ottenere una sospensione omogenea. Usa questa sospensione non appena hai finito di prepararla.
Preparare una scatola di incubazione composta da pozzetti a nido d'ape in un vassoio dotato di coperchio. Aprire la confezione e aggiungere 5 ml di acqua demineralizzata o distillata nei pozzetti del vassoio. Disimballare la striscia fornita nel kit di test API 20E e inserirla nella scatola di incubazione.
Riempi la provetta e la cupola dei pozzetti contrassegnati "GEL", "VP" e "CIT" con la sospensione che hai preparato. Nei restanti pozzetti, riempire la sospensione batterica nella provetta ma non nella cupola. Aggiungere olio minerale nei pozzi contrassegnati con "ADH", "ODC", "LDC", "URE" e "H2S" per creare un ambiente anaerobico.
Coprire la scatola di incubazione con il coperchio e incubare a una temperatura compresa tra 34 e 38 gradi Celsius per 18-24 ore.
Osservare i pozzetti e annotare le reazioni sul foglio dei risultati. A condizione che almeno tre test siano positivi, procedere alle reazioni di colore utilizzando le soluzioni per test chimici, o reagenti, forniti con il kit. Aggiungere una goccia di reagente TDA nel pozzetto contrassegnato con "TDA" e una goccia ciascuno dei reagenti VP1 e VP2 nel pozzetto contrassegnato "VP." Se meno di tre test risultano positivi, incubare le strisce per altre 24 ore prima di aggiungerle reagenti.
Osservare i cambiamenti di colore prodotti nei pozzetti. Un colore marrone rossastro in TDA indica una reazione positiva. Attendere 10 minuti dopo aver aggiunto i reagenti dal kit in VP1 e VP2. Considera un colore rosso o rosa come positivo e un colore rosa pallido che appare dopo 10 minuti come negativo.
Eseguire il test dell'ossidasi come specificato dal produttore del kit e registrarne i risultati insieme ai risultati dei 20 test precedenti.
Inserisci questo numero di profilo a sette cifre nel database del produttore del kit tramite un telefono a toni. Attendi di ricevere l'identificazione fornita dal database. Se il numero del profilo non fornisce risultati specifici, eseguire i test supplementari specificati dal produttore del kit.
