Bagaimana Sampel Disiapkan untuk Dilihat di Bawah Mikroskop?

Sebuah alam yang sebelumnya tak terlihat terungkap pada awal 1600-an dengan pembangunan mikroskop senyawa pertama menyebabkan revisi besar dalam pemahaman ilmiah. Mikroskop senyawa dasar sekarang menjadi peralatan standar dalam kedokteran dan ilmu alam. Cahaya tampak yang ditransmisikan bersinar melalui preparat tipis untuk pembesaran. Transmisi dan pemindaian mikroskop elektron dikembangkan dari tahun 1931 dan seterusnya. Mereka tidak menggunakan cahaya optik, tetapi berkas elektron dan medan magnet untuk melihat spesimen. Terutama untuk penelitian institusional, persiapan spesimen membutuhkan peralatan yang rumit dan mahal.

Ada beberapa jenis mikroskop senyawa khusus, tetapi mikroskop medan terang adalah yang paling umum. Sampel untuk mereka seharusnya hanya beberapa mikron, yang merupakan sepersejuta meter, tebal. Spesimen yang lebih tebal tidak membiarkan cukup cahaya masuk dan tidak memungkinkan pemfokusan yang tepat. Mikroskop lapangan terang memiliki tabung dengan lensa objektif di bagian bawah, paling dekat dengan spesimen, dan lensa okuler, atau lensa okuler, di bagian atas. Beberapa lensa objektif dengan perbesaran yang berbeda berputar pada sebuah nosepiece, atau turret. Panggung tepat di bawah nosepiece memegang slide spesimen, dan di bawahnya sumber cahaya bersinar melalui kondensor ke spesimen. Mikroskop majemuk modern dapat memperbesar objek dari 1.000 hingga 2.000 kali dimensi aslinya.

Untuk benda-benda kecil seperti rambut, serangga kecil, bagian serangga atau serbuk sari, sampel ditempatkan langsung di bagian tengah slide mikroskop kaca atau plastik dengan sedikit media pemasangan, biasanya produk resin sintetis atau alami untuk permanen slide. Untuk slide sementara, seperti setetes air kolam yang mengandung mikroorganisme, air adalah media pemasangan. Lindungi sampel dengan kaca penutup, kaca atau plastik bulat atau persegi yang sangat tipis. Beberapa sampel perlu diwarnai dengan pewarna alami atau sintetis yang dimaksudkan agar mikroskop terlihat dengan baik.

Cara sederhana untuk menyiapkan sampel tipis adalah dengan meremas atau meratakan sepotong kecil jaringan di bawah kaca penutup. Sering digunakan dalam sampel tanaman untuk melihat kromosom, jaringan yang tumbuh cepat seperti ujung akar atau kepala sari mengalami pembelahan sel diawetkan dalam fiksatif, kemudian dilunakkan dan diwarnai untuk mengungkapkan kromosom. Tekanan lembut dari ujung penghapus pensil yang berpusat di atas sampel yang diselipkan penutup memaksa sel-sel terpisah menjadi satu lapisan. Pada sediaan apusan, sampel ditebarkan tipis pada satu slide menggunakan slide lain sebagai penyebar, dan apusan yang dihasilkan dikeringkan dan diwarnai. Dalam kedokteran, sampel cairan tubuh, seperti darah, cairan serebro-spinal atau air mani dioleskan.

Prosedur pemotongan yang lebih rumit terjadi ketika struktur dan organisasi seluruh organisme kecil atau sepotong jaringan perlu dipelajari. Untuk sebagian besar sampel, pertama-tama jaringan diawetkan dan dikeraskan dan airnya dibuang. Kemudian sampel dimasukkan ke dalam media kaku seperti lilin atau plastik dan diiris menjadi bagian yang sangat tipis dengan ketebalan hanya beberapa mikron menggunakan mesin presisi yang disebut mikrotom. Sampel diorientasikan untuk memberikan penampang atau potongan memanjang saat diiris. Bagian-bagian tersebut dilekatkan pada slide mikroskop, media penyisipan dihilangkan, dan jaringan diwarnai untuk membedakan struktur dan sel. Di mana kecepatan sangat penting, seperti dalam biopsi bedah untuk kanker, sampel dibekukan, diiris dengan mikrotom beku, diwarnai dan diperiksa.