Ilmuwan dan teknisi sering kali perlu menghitung konsentrasi sel dalam suspensi. Misalnya, ketika seorang pasien mengambil darahnya di kantor dokter, laboratorium dapat menggunakan metode tertentu untuk mencari jumlah sel darah putih dalam volume darah tertentu. Ini memberi dokter banyak informasi tentang kesehatan tentang pasiennya, terutama sistem kekebalannya dan apakah dia sedang melawan infeksi atau penyakit lain. Tes seperti ini dapat mencari banyak sel lain dalam darah serta cairan tulang belakang dan cairan tubuh lainnya, seperti jumlah sel sperma dalam air mani untuk tujuan kesuburan. Para ilmuwan juga menghitung konsentrasi sel bakteri, ragi dan mikroorganisme lainnya untuk berbagai tujuan mulai dari penelitian ekologi hingga teknologi industri. Salah satu teknik yang paling umum juga diajarkan di banyak kelas biologi perguruan tinggi, dan menggunakan perangkat yang disebut ruang hitung.
Sebelum suspensi sel bisa masuk ke ruang hitung, mungkin perlu pengenceran karena bisa berisi ribuan atau jutaan sel. Dalam hal ini, sel tidak dapat dihitung secara wajar. Untuk mengencerkan sampel, gunakan pipet steril untuk menempatkan sepuluh mikroliter larutan sel dalam tabung reaksi yang berisi 90 mikroliter pengencer. Jenis pengencer akan tergantung pada jenis sel. Campur dengan baik. Larutan ini sekarang sepuluh kali lebih encer daripada sampel awal, jadi faktor pengencerannya adalah 10
-1. Beri label. Ulangi ini beberapa kali, dengan menggunakan pipet steril setiap kali, sampai larutan cukup encer. Jika Anda mengencerkannya untuk kedua kalinya, tabung reaksi kedua 100 kali lebih encer dari larutan awal, jadi faktor pengencerannya adalah 10-2 dan seterusnya.Anda mungkin perlu mencoba beberapa pengenceran untuk menentukan faktor pengenceran yang tepat untuk ruang hitung. Ruang hitung pada dasarnya adalah kotak persegi panjang yang sangat kecil, bening, dengan kedalaman yang tepat dan kisi-kisi yang tepat tertulis di bagian atas. Hal ini juga dikenal sebagai hemositometer, atau kadang-kadang hemasitometer. Tujuannya adalah agar suspensi cukup encer sehingga ketika dilihat di ruang hitung, tidak ada sel yang tumpang tindih, dan sel-sel tersebut didistribusikan ke seluruh grid dengan cara yang seragam. Pipet suspensi encer yang berisi sel ke dalam sumur di ruang hitung, di mana ia akan mengendap ke dalam ruang kisi melalui aksi kapiler. Tempatkan ruang hitung di atas panggung mikroskop dan lihat di bawah daya rendah.
Kotak berisi kotak yang terbuat dari kotak yang lebih kecil lagi. Pilih kira-kira empat atau lima kotak, atau berapa pun jumlah yang Anda perlukan untuk menghitung setidaknya 100 sel, dalam pola yang Anda pilih, seperti empat sudut dan kotak tengah. Jika selnya besar, ini bisa berupa kotak besar, tetapi jika selnya kecil, Anda dapat memilih kotak yang lebih kecil.
Volume spesifik setiap kotak kotak dapat bervariasi menurut produsen ruang penghitungan, tetapi seringkali, kedalaman ruang adalah 0,1 milimeter, luas persegi yang besar adalah 1 milimeter persegi, dan luas persegi yang lebih kecil adalah 0,04 persegi milimeter. Kotak yang lebih besar, kemudian, memiliki volume 0,1 milimeter kubik. Untuk contoh ini, asumsikan Anda menghitung total 103 sel dalam lima kotak, dan Anda mengencerkan sampel awal hingga faktor pengenceran adalah 10-2.
Jika setiap kotak persegi memiliki volume 0,1 milimeter kubik dan lima dihitung, maka total volume ruang yang dihitung adalah 0,5 milimeter kubik, dan ada 103 sel. Digandakan menjadi 1 milimeter kubik akan membuatnya menjadi 206 sel. Satu sentimeter kubik setara dengan 1 mililiter, yang merupakan ukuran yang berguna untuk cairan. Ada 1.000 milimeter kubik dalam sentimeter kubik. Oleh karena itu, jika ada satu sentimeter kubik, atau satu mililiter, suspensi, Anda akan menghitung 206.000 (206 x 1.000) sel. Ini adalah apa yang tampak seperti sebagai persamaan:
Volume kotak kotak × jumlah kotak yang dihitung = volume total suspensi yang dihitung
Jumlah sel volume suspensi yang dihitung = jumlah sel per milimeter kubik
Jumlah sel per milimeter kubik × 1000 = jumlah sel per mililiter
Anda perlu memperhitungkan setiap pengenceran yang dilakukan untuk membuat larutan awal dapat dihitung di bawah mikroskop. Dalam contoh ini, faktor pengenceran adalah 10-2. Untuk menghitung konsentrasi awal larutan:
Jumlah sel per mililiter faktor pengenceran = Konsentrasi sel
Untuk contoh ini, jumlah sel per mililiter adalah 206.000, dan membaginya dengan 10-2 (0,01) memberikan konsentrasi sel 20.600.000 sel per mililiter dalam sampel awal.