Teknik Isolasi untuk Plat Streak

Meskipun tidak dapat dilihat dengan mata telanjang, bakteri ada di mana-mana. Mereka ada di makanan, tanah, air, permukaan di dalam rumah kita, dan di dalam dan di tubuh kita. Bakteri umumnya ada dalam populasi campuran. Isolasi bakteri tertentu dari spesies bakteri lain dalam sampel yang diberikan memungkinkan ahli mikrobiologi untuk mempelajari struktur dan fungsinya, karakteristik yang digunakan dalam identifikasinya. Ahli mikrobiologi sering mengisolasi bakteri menggunakan salah satu dari beberapa teknik pelat gores.

Loop inokulasi digunakan untuk mentransfer mikroorganisme. Ini terdiri dari kawat nichrome atau platinum dengan lingkaran kecil melingkar di salah satu ujungnya. Ujung lainnya lurus dan meluncur ke pegangan. Loop inokulasi plastik sekali pakai juga tersedia. Bakteri hanya dapat diisolasi jika mereka tumbuh. Ahli mikrobiologi menumbuhkan bakteri untuk isolasi gores pada cawan petri dangkal yang berisi media padat, yang disebut agar. Agar meniru lingkungan di mana bakteri tumbuh secara alami. Piring berisi media steril dan tertutup untuk mencegah pertumbuhan organisme yang tidak diinginkan. Selama isolasi pelat gores, loop inokulasi disterilkan berulang kali dalam nyala pembakar Bunsen.

Teknik streak plate adalah metode yang paling populer untuk mengisolasi bakteri tertentu dari sampel yang mengandung campuran mikroorganisme. Teknik ini pada dasarnya mengencerkan jumlah organisme dan mengurangi kepadatannya. Hal ini memungkinkan ahli mikrobiologi untuk membedakan dan mengisolasi koloni bakteri individu. Koloni adalah sekelompok bakteri yang terlihat. Semua bakteri dalam satu koloni berasal dari sel bakteri yang sama. Akibatnya, koloni individu adalah koloni "murni". Koloni murni dipindahkan ke piring lain untuk menghasilkan kultur murni yang terdiri dari satu jenis bakteri.

Jika dilakukan dengan benar, isolasi pelat gores menipiskan spesimen dan memungkinkan sel bakteri individu berkembang menjadi koloni yang terisolasi. Seorang ahli mikrobiologi memulai dengan mensterilkan loop inokulasi dalam nyala api. Dia mendinginkan loop dengan menyentuhnya ke agar-agar, lalu mencelupkan loop ke dalam sampel dan menyebarkannya bolak-balik untuk menutupi bagian piring. Dia mensterilkan loop, mendinginkannya, dan menginokulasi bagian kedua yang berdekatan dari pelat dengan menyeret loop melalui bagian pertama beberapa kali dan menutupi bagian kedua menggunakan zigzag gerakan. Ini mengambil sejumlah kecil bakteri dari bagian pertama dan memindahkannya ke bagian kedua. Berapa kali prosedur dasar ini diulang tergantung pada metode pelat gores yang digunakan. Terlepas dari metodenya, sampel asli digunakan untuk menginokulasi bagian pertama dari pelat saja.

Metode pelat coretan bervariasi menurut jumlah bagian agar yang digores. Metode T-streak menggunakan tiga bagian: bagian atas dan dua bagian bawah berukuran sama. Inokulum awal ditempatkan di bagian atas piring. Bakteri diseret dari bagian atas ke salah satu bagian bawah, lalu dari bagian bawah itu ke bagian lainnya. Dalam metode kuadran, empat bagian berukuran sama digores. Metode goresan terus menerus biasanya melibatkan inokulasi bagian atas pelat, memutarnya 180 derajat, dan menginokulasi separuh pelat lainnya tanpa mensterilkan loop atau menyeret bakteri dari yang sebelumnya bagian.