Agar adalah zat seperti jeli yang berasal dari dinding sel ganggang merah yang dimurnikan. Ini ditambahkan ke media mikrobiologi, yang merupakan bahan di mana mikroorganisme tumbuh di laboratorium, untuk memberikan lebih banyak struktur padat pada zat tersebut. Agar tidak memiliki nilai gizi, jadi ketika para ilmuwan menggunakannya untuk kultur mikroorganisme, mereka menambahkan berbagai nutrisi untuk meningkatkan pertumbuhan bakteri di cawan petri atau tabung reaksi. Ketika peneliti menyimpan bakteri dalam tabung reaksi, disebut sebagai agar miring karena media pertumbuhan cair membeku saat tabung dalam posisi miring. Bagian atas dengan tutup ulir pada bagian miring mencegah agar agar tidak mengering.
Media disiapkan berbeda untuk miring dari cawan petri. Sterilisasi dilakukan dengan agar-agar di dalam tabung; cawan petri disterilkan terlebih dahulu sebelum agar yang disterilkan dituangkan ke dalamnya. Ukur jumlah air yang dibutuhkan dan masukkan ke dalam labu Erlenmeyer. Panaskan di atas kompor hingga hampir mendidih. Tambahkan bahan lain jika perlu dan aduk campuran secara perlahan dan terus menerus sampai larut. Bahan-bahan ini mungkin termasuk ekstrak daging sapi, pepton, dan buffer pH, tergantung pada jenis mikroorganisme yang dibiakkan.
Sebelum menambahkan bubuk agar kering, campur dengan sedikit air suling dingin untuk mencegah penggumpalan. Berhati-hatilah saat menambahkan agar-agar ke dalam cairan panas karena dapat berbusa dan meluap ke panci. Tambahkan agar-agar sedikit demi sedikit dan aduk agar agar-agar merata. Matikan api saat campuran mulai mengukus, sebelum mendidih.
Letakkan tabung reaksi yang tidak tertutup pada rak tabung reaksi. Isi tabung reaksi dengan memindahkan sekitar 5 mililiter - sekitar 0,17 ons atau 1 sendok teh - agar-agar cair dari panci menggunakan pipet steril. Tutup masing-masing tabung reaksi dengan longgar, karena agar-agar tidak akan disterilkan jika tertutup rapat. Sterilkan semua tabung dalam autoklaf selama sekitar 25 menit pada 121 derajat Celcius, atau 250 derajat Fahrenheit.
Saat agar-agar masih panas, miringkan dengan hati-hati rak yang menahan tabung reaksi pada permukaan padat atau a buku tebal, pastikan media di dalam tabung berada pada posisi miring relatif terhadap pengujian tabung. Biarkan media mendingin dan memadat pada sudut ini, yang meningkatkan luas permukaan agar. Kencangkan tutup tabung reaksi setelah agar-agar mendingin. Miring siap digunakan setelah agar-agar mengeras. Mereka dapat disimpan pada suhu kamar atau di lemari es untuk digunakan di masa mendatang.
Inokulasi miring dengan mentransfer sel dengan loop inokulasi dari mikroorganisme berkoloni tunggal di piring ke permukaan miring. Pindahkan loop melintasi permukaan miring dan rekap tabung. Inkubasi miring sampai ada bukti pertumbuhan, kemudian masukkan tabung ke dalam lemari es.