A Western blot teszt, más néven immunblot, egy fehérje keverékben lévő specifikus fehérje tesztje. A Western blot tesztet gélelektroforézis vagy enzimhez kapcsolt immunszorbens assay (ELISA) teszt után hajtják végre, és antitesteket használ a specifikus fehérjék azonosításához.
A nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid-gélelektroforézis (SDS-PAGE) egy általános teszt, amelyet a fehérjék szétválasztására használnak a Western-blotban. A fehérjéket tömeg és elektromos tulajdonságok választják el egymástól, amikor egy gélmátrixon mozognak.
Az ELISA-teszt szilárd felülethez kapcsolt enzimeket vagy antitesteket használ a tesztfelület létrehozásához. Ezután egy mintát adunk a tesztfelületre. A fehérjékre reagáló vagy hozzájuk kapcsolódó antitestek vagy enzimek pozitív eredményt jeleznek.
A Western blot tesztet a gélelektroforézis után végezzük. Az elválasztott fehérjéket nitrocellulóz- vagy nejlonmembránokra viszik át (vagy blotolják), és specifikus antitestekkel azonosítják, amelyeket másodlagos fehérje jelöl.
A Western blot tesztet használjuk a gélelektroforézis vagy az ELISA teszt pozitív eredményeinek megerősítésére. A Western blot teszt pontosabban azonosíthatja a fehérjéket, és kizárhatja a hamis pozitív eredményeket.
