Amikor teszteli a pH enzimaktivitásra gyakorolt hatását, változtatnia kell a pH-n. Ezt azonban megteheti jó vagy rossz módon. Ne feledje, milyen extra tényezők zavarhatják meg a változó pH-t. Ellenkező esetben a kapott eredmények nem a pH változásának, hanem valamilyen más tényezőnek tudhatók be. Annak ismerete, hogy a pH-t hogyan kell megfelelően változtatni, és milyen tényezők zavarják meg a kísérlet pH-értékét, elősegíti a jó eredmények elérését és annak megértését, hogy az eredmények miért nem pontosan azok, amelyeket várt.
Csak egy dolgot változtass meg
A pH enzimaktivitásra gyakorolt hatásának vizsgálatakor csak a pH-értéket változtassa meg, miközben más tényezőket állandóan tart. Ezen egyéb tényezők közé tartozik az enzimkoncentráció, a szubsztrátkoncentráció és a hőmérséklet. Az állandóan maradt tényezőket kontrollváltozóknak nevezzük. A kontrollváltozók lehetővé teszik annak megállapítását, hogy a kísérleted során az enzimaktivitással kapcsolatos eredmények a pH, a független változó változóinak köszönhetők. Annak ismerete, hogy milyen tényezőket nem szabad megváltoztatni egy kísérlet során, ugyanolyan fontos, mint az, hogy milyen tényezőt kell változtatni különben nehéz lesz megállapítani, hogy az eredmények valóban egy dolognak köszönhetők-e tesztelték.
Válasszon egy savat vagy egy bázist
Az oldat pH-ját úgy változtathatjuk meg, hogy különböző mennyiségű savat vagy bázist oldunk vízben. A pH enzimaktivitásra gyakorolt hatásának tesztelésének egyik módja az, ha fokozatosan hozzáadunk egy csepp erős savat vagy erős bázist az enzimet tartalmazó oldatba, majd figyelje meg azt a pontot, amikor az enzimaktivitás lelassul, vagy megáll. A savat olyan vegyületként definiáljuk, amely hidrogéniont adományoz, protonnak (H +) nevezzük, a bázist pedig egy olyan vegyületnek, amely hidroxidiont (-OH) adományoz. Különböző savak és bázisok különböző mennyiségű protont vagy hidroxid-iont adnak el. Nem minden protont vagy hidroxid-iont adnak azonnal, amikor savat vagy bázist adnak az oldathoz, de az adományozott protonok vagy hidroxid-ionok száma különböző sebességgel változtatja meg a pH-t. Ezért egy enzimkísérletben célszerű a pH-t csak egyféle sav vagy egy típusú bázis felhasználásával változtatni. Ellenkező esetben más változókat akaratlanul adunk hozzá.
A szövetek megváltoztatják a pH-t is
Néhány laboratóriumi kísérlet, amely az enzimaktivitást vizsgálja, magában foglalja a friss szövet felőrlését, hogy az enzimek felszabaduljanak a sejtekből, majd szubsztrátot adnak az enzimaktivitás mérésére. A friss szövet vért tartalmaz. A vérben olyan enzimek jelenléte miatt, amelyek a vérben oldott szén-dioxid-gázt szénsavvá változtatják, maga a szövet is befolyásolhatja a pH-t. Így a friss szövetekben végzett enzimaktivitással járó kísérletek során hasznos a vér megmosása egy főzőpohárban, hideg víz előtt. Ez minimalizálja a szövet nem kívánt pH-változását, így tanulmányozható a célirányos pH-változás.
A méretek változatlanok maradjanak
Amint azt fentebb tárgyaltuk, az enzimkoncentráció egy kontroll faktor, amelyet nem szabad megváltoztatni a pH enzimaktivitásra gyakorolt hatásának tesztelésekor. A kísérleti eljárások azonban még mindig finom módon változtatják az enzimkoncentrációt. Ha tiszta enzimoldatot használunk, akkor az enzimkoncentrációt állandó értéken tartjuk. Azokban a kísérletekben, amelyekben az enzim friss szövetből származik, például burgonyadarabokból, növényi darabokból vagy májdarabokból, a darabok mérete megváltoztatja az egyes kémcsövekben lévő enzim mennyiségét. Így hasznos lesz a szövetdarabokat a lehető legegyenletesebben levágni. Ez egy másik példa arra, hogy az, hogy mit nem szabad megváltoztatni, és miért nehéz nem elkerülni a változásokat, segít a különböző tényezők, például a pH eredményeinek értelmezésében.
