Mikrobiolozi, genetičari i molekularni biolozi koriste bakterijske kulture za otkrivanje životnih tajni. Mikrobiolozi proučavaju bakterije kako bi otkrili nove antibiotike za liječenje infekcija. Genetičari koriste bakterije kako bi utvrdili mogu li kemikalije imati kancerogena svojstva. Molekularni biolozi proučavaju biokemijske puteve staničnih procesa kako bi razumjeli funkcije enzima koji su nam zajednički s bakterijama. Koliko god su studije raznolike, sve tri znanosti izoliraju bakterijske kulture koristeći istu tehniku: prugavost agar pločica.
Osnove mikroba
•••Chad Baker / Photodisc / Getty Images
Mikrobi su jednoćelijski organizmi poput bakterija i gljivica. Ti se organizmi brzo razmnožavaju i lako ih je uzgajati, što ih čini posebno korisnima za proučavanje. Kada se u prirodi otkrije potencijalno novi mikrob, uzorak se stavi u medij za rast koji se naziva "juha". Bujoni sastoje se od sterilisane vode, soli, šećera i drugih hranjivih sastojaka koji će pospješiti brzi rast bakterija u tikvici tijekom inkubacija. Međutim, juha će češće sadržavati više vrsta bakterija. Kako bi izolirao pojedinu bakteriju, znanstvenik će mikrobnom tehnikom nazvanom "prugavost" raširiti mali uzorak juhe preko polukrutne agar ploče.
Agar ploče
•••Comstock / Comstock / Getty Images
Agar ploče su poluprozirni, polučvrsti gelovi koji se sastoje od morskih algi i specifičnih koncentracija hranjivih sastojaka. Korisnost agara leži u činjenici da pruža glatku, mekanu površinu za uzgoj bakterija. Kad znanstvenik stavi jednu bakteriju na agar, ona će se razmnožavati udvostručujući se tisućama vremena i pojavljivat će se kao mala kolonija pojedinačnih stanica.
Alati za razmnožavanje bakterija
•••Photos.com/Photos.com/Getty Images
Za razmazivanje bakterija potrebna su tri alata: pločica od agara, alkoholni plamenik i žičana petlja. Agar ploča je medij za rast na koji se bakterije prenose nakon uzgoja u bujonu. Alkoholni plamenik je mala svjetiljka za sterilizaciju žičane petlje punjena alkoholom - duga, tanka ručka s malim karikom vatrootporne žice pričvršćenom na jednom kraju. Petlja će držati sićušnu kapljicu juhe ispunjene bakterijama prilikom prenošenja bakterija iz bujona na pločicu agara.
Proces razmnožavanja bakterija
•••Hemera Technologies / Photos.com / Getty Images
Provlačenje bakterija preko ploče agara jednostavno je, ali ovaj korak morate pravilno izvesti jer inače nećete izolirati zasebne kolonije. Zagrijte petlju preko alkoholnog plamenika za sterilizaciju žice, a zatim umočite vrh petlje u juhu. Provucite vrh petlje naprijed-natrag nekoliko puta preko četvrtine ploče agara. Ponovno sterilizirajte petlju i provucite niz i okomito na prve pruge. Pomaknite petlju naprijed-natrag nekoliko puta preko novog dijela ploče. Sterilizirajte vrh. jednom lagano provucite preko posljednjeg prugastog dijela i pomaknite petlju naprijed-nazad nekoliko puta. Iscrpljenost razrjeđuje početnu kap juhe do točke u kojoj će posljednje pruge sadržavati pojedine kolonije. Stavite ploču u inkubator ili na ploču stola na sobnoj temperaturi i pričekajte da kolonije narastu preko noći. Pojedinačne kolonije u posljednjem nizu postat će izolirane kolonije jedne bakterije.
